1. 收集细胞；

2.3000～5000rpm离心5min，收集沉淀，重悬于200ul的PBS中，再次离心收集沉淀；
3.75％冰冻乙醇（-20度保存）4度固定过夜or-20度固定1h；
4.离心收集沉淀，PBS洗一次（视沉淀量可忽略）；
5.沉淀重悬于200～500ul的PBS，加入Rnase A 37度水浴1h；
6.400目纱布过滤至流式管，加入PI染色，4度避光30min-1h，上机器。