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流式细胞凋亡检测

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参考报价: 99 - 199 RMB(人民币) 型号: 流式细胞凋亡检测
品牌: 云桥璞瑞 产地: 南京
关注度: 暂无 信息完整度:
样本: 暂无样本 典型用户: 暂无
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                           实验步骤: 
1. 细胞收集:悬浮细胞直接收集到10ml的离心管中,每样本细胞数为(1~5)×106,/mL 500~1000r/min离心5min,弃去培养液。
2. 用孵育缓冲液洗涤1次,500~1000r/min离心5min。
3. 用100ul的标记溶液重悬细胞,室温下避光孵育10~15min。
4. 500~1000r/min离心5min沉淀细胞孵育缓冲液洗1次。
5. 加入荧光(SA-FLOUS)溶液4℃下孵育20min,避光并不时振动。
6. 流式细胞仪分析:流式细胞仪激发光波长用488nm,用一波长为515nm的通带滤器检测FITC荧光,另一波长大于560nm的滤器检测PI。
7. 结果判断:凋亡细胞对所有用于细胞活性鉴定的染料如PI有抗染性,坏死细胞则不能。细胞膜有损伤的细胞的DNA可被PI着染产生红色荧光,而细胞膜保持完好的细胞则不会有红色荧光产生。因此,在细胞凋亡的早期PI不会着染而没有红色荧光信号。正常活细胞与此相似。在双变量流式细胞仪的散点图上,左下象限显示活细胞,为(FITC-/PI-);右上象限是非活细胞,即坏死细胞,为(FITC+/PI+);而右下象限为凋亡细胞,显现(FITC+/PI-)。


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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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