蛋白质综合分析
主要承接外包技术服务项目：
蛋白质理化检测、代谢组学、蛋白质组学、糖类分析

蛋白质、多肽药物的整套研究服务

项  目		方    法
活性筛选		酶活性，免疫学活性，理化性质等
初步提取		盐析、分级沉淀、有机溶剂沉淀等
富集浓缩		沉淀、超滤、PEG浓缩等
精细纯化		离子交换、分子筛、疏水、反相、亲和等技术
性质检测	活性	酶活性，免疫学活性，生物学活性
	SDS	常规电泳分析
	HPLC	高效液相分析
	分子量	MALDI-TOF质谱分析
	聚合情况	SDS电泳分析，质谱分析
氨基酸组成分析		全谱氨基酸检测（43种）
肽质量指纹图谱		质谱分析，HPLC（SEC）
序列分析	全序列	Edman降解，串联质谱
	N端序列	Edman降解
	C端序列	串联质谱
	随机序列	串联质谱
	N端均一性	Edman降解
二硫键分析		还原烷基化 + 质谱分析
药物蛋白鉴定		数据库检索，一级结构分析
重头测序		串联质谱

 

实验室仪器配置清单    见附件1

具体介绍
 

第一部分：液相方面
 

检测仪器	纯化对象
1.       快速蛋白纯化系统ÄKTA avant 25（美国GE）	A.       天然蛋白质,多肽
2.       快速蛋白纯化系统ÄKTA explorer（美国GE）	B.       合成的多肽类药物
3.       快速蛋白纯化系统ÄKTA Purifier 10（美国GE）	C.       重组蛋白质,多肽
4.       纳流二维高效液相Agilent Nano 2D-HPLC（美国Agilent）	D.       其它生物大分子

色谱柱配置
离子交换	预装柱：Mono Q/S系列(高分辨)；Source Q/S系列(快速)；HiLoad系列(高载量)
体积排阻	预装柱：Superdex系列(高分辨)；Superose系列(宽范围)；HiPrep系列(高载量)
疏水层析	预装柱：Resource PHE/ETH/ISO(高分辨)；HiPrep系列(高载量)
亲和层析	预装柱：HisTrap HP系列(高分辨)；GSTrap HP(高分辨)
反相层析	预装柱：Zorbax 300SB C-3/8/18； Zorbax Eclipse XDB C-18；其它各种柱子

 

第二部分：测序方面
 

蛋白多肽自动测序仪

 

N端测序技术(Edman降解法)主要特点
N端测定	只针对蛋白质、多肽、小肽等的 N 末端氨基酸进行检测
检测能力	N 端连续 60 个以上的氨基酸
样品来源	天然（动物/植物/微生物）；合成多肽；表达重组等
应用方面	蛋白质多肽序列：结构验证，断点寻找，修饰判断，定位活性区域等等
急速检测	合格样品，1个工作日可以出结果

氨基酸N端测序实例结果

序列结果：N-Ser-ILe-Gln-Met-Val-Leu-C
 

 

第三部分：质谱鉴定
 

质谱检测项目

1、生物大分子的分子量精确测定

2、蛋白质的肽质量指纹图谱分析

3、已知蛋白质的高通量鉴定分析

4、未知蛋白的部分或全序列分析

5、蛋白质多肽的二硫键定位分析

6、混合蛋白快速鉴定与测序分析

7、iTRAQ、SILAC、Label-free

8、PEG 修饰蛋白药物的质谱分析

第四部分：糖类分析——寡糖/低聚糖定性定量分析
 

离子色谱ICS 5000在糖分析中的应用

1、糖定性分析，糖定量分析；

2、单、双糖，低聚糖，多聚糖分析；

3、氨基糖、中性糖、酸性糖、糖醇及其它糖衍生物

 

第五部分：氨基酸组成分析
 

质谱40OO Q-Trap在氨基酸分析中的应用

1、氨基酸组成分析（45种）

2、氨基酸定量分析

3、游离氨基酸分析

4、检测氨基酸类别：A、必需氨基酸；B、必需氨基酸衍生物；C、氨/能量新陈代谢物；D、硫新陈代谢物；E、附加代谢物

 

第六部分：综合技术服务 —— 样品提取；SDS电泳；PVDF转膜；活性检测；有机酸分析；脂肪酸分析等

 

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途