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MIC RNA

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参考报价: 200 RMB(人民币) 型号: MIC RNA
品牌: 华腾生物 产地: 广州
关注度: 暂无 信息完整度:
样本: 暂无样本 典型用户: 暂无
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micRNA是(mRNA-interfering complementary RNA)的缩写,能与被调控的RNA或DNA互补的小分子。

mRNA干扰性互补RNA,又称反义RNA,通过碱基的互补配对与目标mRNA或DNA形成双链复合物,影响RNA的修饰、翻译、转录等过程,封闭或抑制基因的正常表达 。
 

实验流程:

取材-RNA提取逆转录成cDNA-QPCR扩增-数据分析-发报告

miRNA采取特异性逆转录,采用的是茎环法


  送样运输要求:

1. 样品处理

a) 动物组织:常规组织100mg,脂肪组织,结缔组织,纤维化组织适当增加。将组织剪切成合适大小后(建议组织块长宽高均不大于0.5 cm),然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNAsolidTM试剂中。(注意:已浸入RNAsolidTM试剂中的组织经平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块,再重新放回RNAsolidTM试剂中;有些比较弱的液体渗透性组织如骨头等,不适合用RNAsolidTM试剂进行RNA保护。)

b) 植物组织:新鲜的叶、果肉、种子等最少100 mg。将嫩叶,嫩茎组织切成合适的大小(建议长宽高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNAsolidTM试剂中。(注意:某些植物组织天生具有的屏障,如叶子表面的蜡层可阻碍RNAsolidTM试剂的渗透,对于此类组织,通常需破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。)

c) 细胞等样本:收集不小于10^6个细胞的沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后迅速加入5~10倍体积的RNAsolidTM试剂。

d) 酵母、细菌等样本:离心弃上清,收集小米粒大小的单菌体沉淀,然后迅速加入适量的RNAsolidTM试剂完全浸没菌体沉淀。

e)全血:最少1 mL新鲜血液EDTA抗凝管,-20度运输。

f)血清:最少1 mL,干冰运输。

g) RNA样品: OD260/280为1.8-2.0,浓度≥100 ng/μL,体积≥20μL,干冰运输。

h)cDNA(必须能检测miRNA基因):cDNA原液≥20 μL,干冰运输。

 

2. 样品保存及运输

加入有RNAsolidTM试剂的样本可在37℃保存1~2天,2天以后部分组织中的RNA会开始降解。室温(25℃)稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。大部分样品置于RNAsolidTM试剂中,4℃条件下可稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。长期存放可先将保存在RNAsolidTM试剂中的样本4℃浸透过夜,然后将RNAsolidTM试剂吸出弃去,再将样本放入-20℃或-80℃长期稳定保存3~5年。







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