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参考报价: | 面议 | 型号: | RNA干扰 |
品牌: | 怀信生物 | 产地: | 江苏无锡 |
关注度: | 暂无 | 信息完整度: | |
样本: | 暂无样本 | 典型用户: | 暂无 |
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二)RNAi载体构建
RNAi载体表达可以长时间稳定地研究基因功能,载体在细胞中持续抑制靶基因的表达可达数星期甚至更久。
miR RNAi载体构建-利用细胞内源性的miRNA加工机制,相比传统shRNA载体可更高效地表达RNA发夹结构,并具有采用EmGFP进行表达追踪和顺式表达多个miRNA的优点。Invitrogen针对人类、大鼠、小鼠的大多数基因预先设计好了BLOCK-iT miR RNAi Select序列,每个基因设计的4条BLOCK-iT miR RNAi Select序列我们保证至少有2条可以达到至少70%转录水平的knockdown(在转染效率>80%的前提下)。
shRNA载体构建—设计针对特定基因的shRNA序列,并将其连入组成型pENTR™/U6或诱导型pENTR™/H1/TO载体中。
三) RNAi导入优化
由于siRNAs是进入细胞后才能对蛋白的表达进行抑制,因此如何高效地将siRNAs转入细胞也是成功抑制基因表达的关键步骤。例如,一个siRNA分子对某特定基因的抑制效率为90%,而转染效率为10%,那么最后抑制蛋白表达最后的效率只有9%,可见如何提高siRNAs的导入效率非常重要。
RNAi转染优化-为了使得RNAi实验获得最大化的干扰效果,利用Invitrogen专利的脂质体转染试剂技术,针对多种真核生物细胞进行转染参数的优化。RNAi 荧光标记的阴性对照、阳性对照可以用于进行转染效率的优化。
病毒侵染优化-针对难于转染细胞(特别是神经细胞、悬浮细胞、干细胞)和In vivo实验,基于Invitrogen的RNAi病毒载体构建、包装、浓缩等技术,利用腺病毒或慢病毒进行RNAi研究
筛选RNAi稳定细胞株-利用抗生素来筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株
四)RNAi干扰效果检测
用实时定量PCR方法检测mRNA水平的基因敲减效果;通过Western blot方法检测蛋白水平的基因敲减效果
三、RNA干扰服务说明
1、客户提供:提供RNA名称序列;
2、实验周期:2-3周;
3、若另有疑问欢迎向本公司咨询,我们将竭诚为您服务。
四、质量承诺
1、真实的原始实验数据;
2、权威的实验报告;
3、详细的实验步骤。
RNA干扰信息由无锡怀信生物医药科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于RNA干扰报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途