NF-κB研究方案

1986年,研究人员发现一种能与B细胞的免疫球蛋白kappa轻链增强子κB序列特异结合，调节其基因表达的核蛋白因子，称之为发NF -κB。它们可以调节许多与免疫功能和炎症有关的基因，在机体生理和病理条件下，发挥重要的功能。

NF-κB为一个转录因子蛋白家族，包括5个亚单位:Rel (cRel)、p65 (RelA, NF-κB3)、RelB和p50(NF-κB1)、p52(NF-κB2)。p65 、cRel和RelB分含有N端Rel同源区(RHD)和C端的反式激活结构域（TD），在RHD的C末端有一个核定位区域(NLS)，负责与DNA结合、二聚体化和和核易位，而TD则与转录活化相关。p50和p52只有RHD而缺乏TD，因此，p50和p52同源二聚体并不能激活基因转录，而是作为一种抑制分子存在，它们在细胞内通常各自以其前体p105和p100的形式存在。两个亚基形成的同源和/或异源二聚体与靶基因上特定的序列（-κB 位点）结合调节基因转录，不同的NF-κB二聚体在选择结合序列时可能略有差异，这是NF-κB通过不同的二聚体的形式对不同基因的表达进行精细调节的一种方式。zei常见的NF-κB二聚体是p65与 p50组成的异二聚体。NF-κB 的抑制单位IκB通过其C末端特定的锚蛋白重复序列与NF-κB结合，并覆盖NLS阻止NF-κB向细胞核内转移。在静息的细胞中，NF-κB 和IκB形成复合体，以无活性形式存在于胞浆中。当细胞受到各种胞内外刺激后，IκB激酶被激活，从而导致IκB蛋***酸化，泛素化，然后IκB蛋白被降解， NF-κB二聚体得到释放。然后NF-κB二聚体通过各种翻译后的修饰作用而被进一步激活，并转移到细胞核中。在细胞核里，它与目的基因结合，以促进目的基因的转录。

参与免疫反应的早期和炎症反应各阶段的许多分子都受NF-κB的调控，包括：TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12、iNOS、COX2、趋化因子、粘附分子、集落刺激因子等。此外，锌指蛋白A20、血红素加氧酶-1 (HO-1)等一些抗炎和与细胞凋亡有关的分子如：肿瘤坏死因子受体相关因子-1（TRAF-1），抗细胞凋亡的蛋白-1和-2（IAP1/ IAP2），TNF 受体相关因子（TRAF1 /TRAF2），Bcl-2 同源体 A1/Bfl-1和 IEX-IL也都受NF-κB的调控。

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Ø  NF-KB信号通路相关抑制剂

Ø  NF-KB信号通路相关基因过表达干扰质粒/慢病毒

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NF-κB为一个转录因子蛋白家族，包括5个亚单位：Rel (cRel)、p65 (RelA, NF-κB3)、RelB和p50(NF-κB1)、p52(NF-κB2) p65 、cRel和RelB分含有N端Rel同源区(Rel homology domain, RHD)和C端的反式激活结构域（transactivation domain, TD），在RHD的C末端有一个核定位区域(nuclear-localization sequence, NLS)，负责与DNA结合、二聚体化和和核易位，而TD则与转录活化相关。p50和p52只有RHD而缺乏TD，因此，p50和p52同源二聚体并不能激活基因转录，而是作为一种抑制分子存在，它们在细胞内通常各自以其前体p105和p100的形式存在。两个亚基形成的同源和/或异源二聚体与靶基因上特定的序列（-κB 位点）结合调节基因转录，不同的NF-κB二聚体在选择结合序列时可能略有差异，这是NF-κB通过不同的二聚体的形式对不同基因的表达进行精细调节的一种方式。zei常见的NF-κB二聚体是p65与 p50组成的异二聚体。NF-κB 的抑制单位IκB通过其C末端特定的锚蛋白重复序列(ankyrin repeat motif)与NF-κB结合，并覆盖NLS阻止NF-κB向细胞核内转移。在静息的细胞中，NF-κB 和IκB形成复合体，以无活性形式存在于胞浆中。当细胞受细胞外信号刺激后，IκB激酶复合体（IκB kinase, IKK）活化将IκB***酸化，使NF-κB暴露核定位位点。游离的NF-κB迅速移位到细胞核，与特异性κB 序列结合，诱导相关基因转录。Rel/ NF-KappaB 转录因子家族涉及应激诱导，免疫和炎症反应。 另外，这些分子在某些造血细胞，角质形成细胞和淋巴器官结构的发育过程中发挥重要作用。zei近的研究发现，NF-κB家族成员与肿瘤发生和神经突触形成有关。NF-κB在细胞程序性死亡和增殖调控中起重要作用(Heissmeyer V, 2009；Pomerantz JL，2002；Hinz M,1999)。

NF-κB可通过LPS（脂多糖）、炎症性细胞因子如TNF（肿瘤坏死因子）、IL-1（白介素-1），生长因子、淋巴因子、氧化剂自由基、吸入颗粒、病毒或细菌的基因产物、UV照射、B或T细胞活化而激活。。zei有效的NF-κB的活化剂是促炎性细胞因子IL-1和TNF，导致KappaBs快速***酸化在其N-末端的调节结构域）.持续完全抑制NF-κB会导致细胞凋亡，非特异性免疫和细胞生长减缓（Baldwin AS Jr，1996）。

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