siRNA高效表达慢病毒载体构建 |
1. 通过专业设计人员的精心筛选获得欲筛选的siRNA序列 |
2. 设计siRNA 正义、反义链,选择相应loop结构,加上酶切位点的目的序列 |
3. 合成相应的DNA序列,然后克隆于相应的慢病毒表达载体 |
4. 将载体转化到宿主菌中进行克隆、筛选,得到质粒重组体即siRNA表达载体 |
5. siRNA表达载体在真核细胞中可产生siRNA,从而在细胞内产生特定基因的沉默效果。此方法是多种siRNA制备方法中唯一可以进行长期基因沉默研究的方法 |
本公司为您提供siRNA高效表达慢病毒载体构建服务。构建好的siRNA表达载体,可直接用于转染细胞进行RNA干扰操作。 |
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服务要求
1. 通过E-mail发送订单,告知选定的相应的基因信息,待构建的靶点信息。靶基因在NCBI数据库中的Gene ID、Accession No.
2. 我们可为您免费设计siRNA序列.
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订购流程 |
1. 请用E-mail或者电话联系吉玛公司。E-mail:order@genepharma.com;Tel******/P>
2. 根据客户提供的基因信息设计siRNA序列,并由客户确认。
3. 根据客户提供的siRNA序列信息或经客户确认的siRNA序列信息设计引物。
4. 根据所选择的慢病毒载体构建相应的siRNA表达载体。
5. 在完成相应的试验后,我们将为您提供一套完整的实验结果,其中包括:实验操作说明、电子版的测序结果及彩图、构建好的siRNA慢病毒表达载体质粒及其穿刺保存菌、试验中所用引物等。 |
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根据客户的需要克隆目的片段或shRNA序列到所选择的慢病毒载体,然后进行细胞转染及病毒生产。 |
服务要求
1 客户提供构建好的慢病毒载体质粒或者经过我们公司构建的慢病毒载体质粒
2 您需要提供载体的完整序列
3 需要测序的,您必须提供相关的引物
4 告诉我们您需要的病毒量(TU)以及病毒的滴度范围,我们一般提供的病毒滴度在5×108—1×109 TU/ml
5 如果对病毒量有特殊要求请直接联系吉玛公司
6 在完成相应的试验后,我们将为您提供一套完整的实验结果,其中包括:实验操作说明、打印的 测序结果及彩图、慢病毒表达载体滴定报告单。 |
产品提供形式 |
1 构建好的慢病毒载体第一次包装与纯化,滴度在5×108-1×109 TU/ml之间,总量为1ml
2 包装与纯化后的病毒载体续包装,每次包装滴度在5×108-1×109 TU/ml之间,总量为1ml
3 如果需要大量病毒液用于动物实验,我们可提供滴度达1010 TU/ml以上高度纯化的病毒液,总量1ml
4 现有的GFP阳性对照病毒液,每支包装滴度在2×108 TU/ml之间,总量为1ml |