基因研究中常需要通过上调靶基因的表达来观察表型变化。过表达(Over-Expression,OE)是上调基因表达最常用的方法,其基本原理是将目的基因的编码区(coding sequence,CDS)构建到质粒或病毒载体中,导入细胞内使基因的表达量增加。根据用途,载体主要分为克隆载体、原核表达载体、真核表达载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、 逆转录病毒载体等。
过表达
过表达如何选择合适的载体呢?
首先我们需要考虑这几个方面:
1. 工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;
2. 工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;
3. 工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。
其次,我们需要了解载体中的每一个元件代表什么。实际应用中,可根据实验目的来挑选合适的载体元件。下面是载体图谱上常见元件介绍:如启动子、荧光标签、抗性、多克隆酶切位点MCS等。
产品介绍
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载体选择
引用文献
1. Identification of genomic alterations in oesophageal squamous cell cancer. 2014, Nature (IF= 41.577). 吉凯产品:过表达质粒 研究领域:食管鳞状细胞癌 中国医学科学院
2. The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding. 2017, Cell stem cell (IF= 23.29). 吉凯产品:过表达质粒 研究领域:神经 中科院生物物理所
3. The metabolic ER stress sensor IRE1α suppresses alternative activation of macrophages and impairs energy expenditure in obesity. 2017, NATURE IMMUNOLOGY (IF=21.506). 吉凯产品:过表达慢病毒 研究领域:能量代谢 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所
4. Cardiac Fibroblast-Specific Activating Transcription Factor 3 Protects Against Heart Failure by Suppressing MAP2K3-p38 Signaling. 2017, Circulation (IF= 18.881). 吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:心力衰竭 首都医科大学附属安贞医院
5. Yes-Associated Protein Promotes Angiogenesis Via Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Endothelial Cells. 2018, Circulation research (IF= 15.211). 吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:血管生成 天津医科大学
6. Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of mir-125b. 2018, Circulation research (IF= 15.211). 吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:心肌梗死 浙江大学第二附属医院
7. EphrinB2 Regulates Cardiac Fibrosis Through Modulating the Interaction of Stat3 and TGF-β/Smad3 Signaling. 2017, Circulation Research (IF=13.965). 吉凯产品:RNAi慢病毒和过表达慢病毒 研究领域:心脏纤维化 浙江大学医学院附属第二医院
8. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) opposes hepatocellular carcinoma progression by regulating AMP-activated protein kinase signaling in mice. 2017, Hepatology (IF=13.246). 吉凯产品:过表达慢病毒 研究领域:肝癌 第二军医大学
9. Deficiency of tumor suppressor NDRG2 leads to attention deficit and hyperactive behavior. 2017, The Journal of Clinical Investigation (IF=13.251). 吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:多动症 空军军医大学(第四军医大学)附属西京医院
10. Gephyrin Palmitoylation in Basolateral Amygdala Mediates the Anxiolytic Action of Benzodiazepine. Biological Psychiatry (IF= 11.982). 吉凯产品:过表达AAV 研究领域:焦虑症 华中科技大学同济医学院
11. Gene deficiency and pharmacological inhibition of caspase-1 confers resilience to chronic social defeat stress via regulating the stability of surface AMPARs. Molecular Psychiatry (IF= 11.64). 吉凯产品:过表达AAV 血清型:AAV1 研究领域:抑郁症。华中科技大学同济医学院
12. Long non-coding RNA H19 contributes to apoptosis of hippocampal neurons by inhibiting let-7b in a rat model of temporal lobe epilepsy. Cell Death and Disease (IF=5.638). 吉凯产品:干扰和过表达AAV 血清型:AAV9 研究领域:颞叶癫痫 首都医科大学
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