cDNA克隆 (cDNA cloning)
定义:从基因的转录产物(如mRNA)开始,逆转录合成互补DNA(cDNA),然后重组入载体,经过复制,筛选得到单一种cDNA分子的技术。
cDNA克隆的一般实验过程:
1、提取总RNA,并分离mRNA
2、逆转录PCR,合成cDNA双链
3、制备载体,并连接cDNA双链和载体
4、质粒转化
5、快速鉴定、菌落PCR
6、cDNA 文库的扩增和建立
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