转染级质粒大规模制备 

定义：常规方法提取的质粒由于浓度低且内毒素含量较高，不能直接用于细胞转染实验。利用高品质质粒抽提试剂可为您提供转染级别的大提质粒，可直接用于细胞转染实验。
质粒提取一般实验过程：

1.挑取琼脂培养皿上的单个菌落，移至3-10mlLB培养液中，37℃150rpm培养过夜。

2.取1.5ml培养液移至Eppendorf管内，12000rpm离心1分钟，弃上清液。

3.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液（GTE溶液）中，强烈振荡使之充分混匀。

4.加入200μl新鲜配置的溶液（NaOH/SDS溶液），盖严管盖轻轻颠倒离心管数次以混合内容物，置冰上5-10分钟。
5.加入150μl溶液（5mol/L乙酸钠，pH5.2），轻轻颠倒数次，使溶液充分混匀，冰上放置3-5分钟。

6.10000rpm,4℃下离心10分钟，将上清液转移至另一离心管中。

7.加等体积的酚:氯仿，振荡混匀，10000rpm,4℃离心2min，将上清转移至另一离心管中。

8.加两倍体积无水乙醇沉淀双链DNA，充分混匀，室内放置2分钟

9.10000rpm,4℃下离心10分钟。

10.弃上清液，加1ml70％乙醇洗涤沉淀双链DNA，10000rmp，4℃下离心5分钟，倒尽乙醇，吸干管口残留乙醇。 11.加40μg/ml RNase的TE的缓冲液溶解DNA，电泳检测

武汉巴菲尔生物-转染级质粒大规模制备价格

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