1.产品简介:

　　次生代谢物是植物生命活动十分重要的物质，与植物防御病虫害及应对环境胁迫密切相关。基于广泛靶向代谢组技术，迈维建立了包括3500多种次生代谢物的数据库，助力于植物次生代谢组学研究。

　　应用方向：

　　◆ 植物次生代谢物成分鉴定

　　◆ 植物次生代谢物通路研究

　　◆ 植物抗病虫害研究

　　◆ 药用植物活性成分鉴定

　　◆ 植物药用功能与作用机制研究

　　2.技术路线:

　　技术优势：

　　◆ 数据库大：包含3500多种物质，TCM领域最大数据库

　　◆ 数据库全： 60科400多个物种构成，覆盖常见物种

　　◆ 物质种类多：包括萜类400多种，生物碱800多种，香豆素180多种，甾体200多种… …

　　◆ 定性准确：自主研发二级谱匹配方法，项目样本物质二级谱与公司数据库二级谱逐一智能匹配

　　◆ 定量准确：三重四级杆MRM模式，定量黄金标准，准确检测物质相对含量

　　3.样品要求：

　　1.取样建议

　　a. 叶片、茎、花等组织，取下后立即放入液氮中速冻2min以上，然后转移到-80℃保存，避免反复冻融。较大叶片需要用剪刀快速剪碎。

　　b. 地下组织(根、块茎等)，将分离出的样本快速用灭菌水清洗，吸水纸吸走多余的水分后，立即放入液氮中速冻2min以上，然后转移到-80℃保存。块根等组织，需要切成 1-2cm 大小块状。

　　c. 果肉、果皮组织，如果野外现场不具备分离条件，需尽快(30min内)转移至室内，低温条件下将分离果皮或果肉切成 1-2cm 块状，立即放入液氮中速冻2min以上，然后转移到-80℃保存。

　　d. 细胞样本，取样后离心去除培养基，立即放入液氮中速冻2min以上，转移到-80℃保存。

　　2.混合取样

　　取样时为了保证样品的准确性和减少系统误差，每份样品选取 3 株以上长势一致的材料混样。以水稻叶片为例：取同一时期，表型基本一致的同一部位1片叶片，同时取6株，放入10ml离心管中，迅速放入液氮中。

　　3.样品量与生物学重复

　　a.每份样品取鲜样不低于3g，干样不低于1g，细胞样品细胞量不低于107。

　　b.每组至少3个生物学重复，准备备份。

　　4.储存与运输

　　-80℃保存，足量干冰运输，避免反复冻融，干冰建议用量 5kg/天(根据样本运输需要时间计算)。

　　4.案例分析：

　　案例分析：桃儿七中鬼臼毒素合成通路的代谢及转录分析

　　鬼臼毒素是是抗肿瘤药物依托泊苷的前体，但其生物合成途径中只有一部分是已知的。作者利用转录组和代谢组技术，对鬼臼毒素途径中的生物合成基因进行了鉴定。选择了29个候选基因在烟草中组合表达，并鉴定了6种途径酶。通过在烟草中共表达10个基因，重建了(-)-4'-desmethylepipodophyllotoxin的途径，这是一种天然产生的木脂素，是依托泊苷的直接前体，与鬼臼毒素不同的是，它是一种有效的拓扑异构酶抑制因子。最终，作者完成了鬼臼毒素完整的合成通路，并且实现了体外烟草中鬼臼毒素的合成。

桃儿七中鬼臼素的生物合成途径

　　5.参考文献：

　　Lau W, Sattely ES.Six enzymes from mayapple that complete the biosynthetic pathway to the etoposide aglycone.Science. 2015,349(6253):1224-1228.

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