1.产品简介

　　黄酮代谢组是基于广泛靶向代谢组学的方法，可同时检测1000多个黄酮类物质的明星产品。黄酮作为一类苯丙氨酸代谢产生的多酚类化合物，在植物中生理过程中参与着重要的作用，如根的生长、花的传粉、病原菌及紫外胁迫，同时作为一种很强的抗氧化剂，也被广泛应用于人体疾病治疗与食品保健。本产品旨在对黄酮类物质进行定性定量分析，助力黄酮代谢生物学研究。

　　应用方向：

　　◆ 样本黄酮代谢物成分分析

　　◆ 植物抗衰老抗氧化等非生物胁迫研究

　　◆ 植物抗病抗虫等生物胁迫研究

　　◆ 植物营养和色泽机理研究

　　2.技术路线

　　技术优势：

　　◆ 自建通路图：对3个黄酮类物质KEGG代谢通路进行了补充

　　◆ 定性准确：自主研发二级谱匹配方法，项目样本物质二级谱与公司数据库二级谱逐一智能匹配

　　◆ 定量准确：三重四级杆MRM模式，定量黄金标准，准确检测物质相对含量

　　◆ 物质多、种类全：自主构建黄酮代谢物数据库，包含1000多个黄酮物质，涵盖12类以上黄酮代谢物

　　3. 样品要求

　　1.取样建议

　　a. 叶片、茎、花等组织，取下后立即放入液氮中速冻2min以上，然后转移到-80℃保存，避免反复冻融。较大叶片需要用剪刀快速剪碎。

　　b. 地下组织(根、块茎等)，将分离出的样本快速用灭菌水清洗，吸水纸吸走多余的水分后，立即放入液氮中速冻2min以上，然后转移到-80℃保存。块根等组织，需要切成 1-2cm 大小块状。

　　c. 果肉、果皮组织，如果野外现场不具备分离条件，需尽快(30min内)转移至室内，低温条件下将分离果皮或果肉切成 1-2cm 块状，立即放入液氮中速冻2min以上，然后转移到-80℃保存。

　　d. 细胞样本，取样后离心去除培养基，立即放入液氮中速冻2min以上，转移到-80℃保存。

　　2.混合取样

　　取样时为了保证样品的准确性和减少系统误差，每份样品选取 3 株以上长势一致的材料混样。以水稻叶片为例：取同一时期，表型基本一致的同一部位1片叶片，同时取6株，放入10ml离心管中，迅速放入液氮中。

　　3.样品量与生物学重复

　　a.每份样品取鲜样不低于3g，干样不低于1g，细胞样品细胞量不低于107。

　　b.每组至少3个生物学重复，准备备份。

　　4.储存与运输

　　-80℃保存，足量干冰运输，避免反复冻融，干冰建议用量 5kg/天(根据样本运输需要时间计算)。

　　4. 案例分析

　　案例分析：MdUGT88F1-mediated phloridzin biosynthesis regulates apple development and Valsa canker resistance

　　MdUGT88F1介导的根皮苷生物合成调节苹果发育和腐烂病抗性

　　根皮苷是苹果中最主要的二氢查尔酮，其含量约占叶片可溶性总酚的90%左右，目前苹果根皮苷的生物学功能在很大程度上仍是未知的。该研究前期，利用苹果种质资源二氢查耳酮的多样性(含量和种类)，鉴定出苹果体内催化根皮素合成根皮苷的关键糖基转移酶P2'GT，MdUGT88F1。当MdUGT88F1基因被RNAi干扰后，减少的根皮苷，通过调节苯丙烷素途径流通量，间接造成木质素合成积累减少;同时，通过间接减少肌醇含量，造成植株细胞壁果胶组成发生变化，最终植株表现细胞壁沉积受干扰，生长发育受阻。在MdUGT88F1-RNAi植株中，根皮苷含量减少不仅能直接限制病原菌生长和毒素产生，而且还能通过间接干扰细胞壁沉积，介导SA和ROS积累。同时，组织紧密性加强和大量积累的SA与ROS直接限制了V. mali 的侵染，最终干扰植株表现为生长发育受抑制，抗病能力增强。

图1 水杨酸、木质素和根皮苷生物合成途径

图2MdUGT88F1介导的根皮苷生物合成调节苹果发育和腐烂病抗性模型

　　5.参考文献：

　　Kun Zhou, Lingyu Hu,et al.MdUGT88F1-mediated phloridzin biosynthesis regulates apple development and Valsa canker resistance.Plant Physiology.2019.

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