致备将始终确保为客户提供的细胞具有真实性、正确性，无交叉污染， 客户因购买细胞而产生的质量和真假的后顾之忧，以 的诚意提供信息 的细胞产品。并提供专业的细胞鉴定服务（采用ATCC细胞鉴定金标准--STR基因分型技术），并建立完善鉴定，种类齐全的细胞资源库，能为广大科研工作者在发表高质量文章时提供可靠的“细胞鉴定依据”。

细胞衰老
一、技术简介
细胞衰老（cell aging）是指细胞在执行生命活动过程中，随着时间的推移，细胞增殖与分化能力和生理功能逐渐发生衰退的变化过程。细胞的生命历程都要经过未分化、分化、生长、成熟、衰老和死亡几个阶段。衰老死亡的细胞被机体的免疫系统清除，同时新生的细胞也不断从相应的组织器官生成，以弥补衰老死亡的细胞。细胞衰老死亡与新生细胞生长的动态平衡时维持机体正常生命活动的基础。

二、实验流程
细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescence β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase; SA-β-Gal)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂，并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊，不同于一些损伤诱导的细胞休眠，也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞通常体积变大，并表达在pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式，同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

操作建议：收到细胞后，请用75%酒精对细胞培养瓶外表进行消毒，并将细胞置于培养箱中稳定至少1h以上，待细胞形态正常，方可进行后续操作及细胞实验。(开封前如有污染及质疑形态请及时反馈)

 

1.若细胞密度未超过85%，且瓶上无特殊标注，则可以收集过滤多余的培养液，视实际情况留6-8ml培养液培养过夜后处理。
2.细胞密度超过75%即可以进行传代。同样收集过滤多余的培养液，用PBS洗涤1-2次，加入1ml胰酶消化液，室温下消化，对光观察，轻拍甁壁若细胞能呈流沙状脱落，则立即用胰酶用量2倍以上的含10%血清的完全培养液终止消化，可轻轻吹打几次细胞，尽量使其变成单细胞悬液，将细胞收集于离心管中1000r离心5min即可，弃去上清，轻弹管底，将细胞弹散，加入2-3ml左右新鲜培养液重悬细胞，按所需比例进行传代。
冻存条件： 70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO(可以使用成品冻存液)
保存条件： -80℃冰箱建议不超过6个月；长期保存请使用液氮
注意事项： 1. 如收到的细胞没有相关培养经验，建议 次消化时在显微镜下实时观察消化情况，掌握细胞的 消化时间，若3分钟内无法脱落的细胞，可以在37℃条件下提高胰酶活性，适当延长时间，从加入胰酶到终止消化的过程，所有操作都要迅速；
2. 建议收到细胞后的 次传代比例为1/2 多不要超过1/3；
3. 若细胞拉丝、黏连则说明消化过度，建议适当缩短消化时间，若发现仅有一半细胞先脱落，则可以优先终止，剩下的继续消化。
售后咨询： 1.培养瓶出现破裂或漏液现象，请立即拍照并及时与我们联系；
2.开封前发现污染或质疑形态，请立即拍照并及时与我们联系；
3.发现较多细胞脱落，请先放培养箱静置1-2h再观察，若细胞能够贴回，请及时传代重铺，若不能请立即拍照并与我们联系；
4.如有任何疑问，均可与我们技术人员进行反馈。

 

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