技术原理
慢病毒载体构建的基本原理是保留顺式作用元件,去除反式作用元件。
以HIV-1为基础的慢病毒载体系统由两部分组成,即核心载体成分和包装成分。包装成
分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需要的顺式作用元件而构建,它能够反式提
供产生病毒颗粒所必须的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所
需的HIV-1顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点即在此位点插入的目的
基因。为降低两种成分同源重组恢复成野生型病毒的可能,需尽量减少二者的同源性。包装
成分一般情况下被分开构建到两个或三个质粒上,其目的也是降低恢复成野生型病毒的可
能。将包装成分与载体成分的三个/四个质粒共同转染包装细胞后,经过超速离心即可在上
清中获得只有一次性感染能力且无复制能力的、携带目的基因的HIV-1载体。
慢病毒载体的安全性
现在使用的慢病毒载体为自身失活慢病毒载体(SIN)。SIN慢病毒载体去除了载体3’
端长末端重复序列(LTR)中的U3区增强子和启动子序列,这使得在逆转录过程中形成的子
代载体5’LTR缺少增强子和启动子序列,因而即使在所有病毒蛋白都存在的情况下也不能转
录RNA,一定程度上提高了载体的安全性。
实验流程
1.慢病毒载体构建
2.慢病毒包装及浓缩,测定滴度
3.感染细胞检测抑制或超表达效率
服务说明
1.针对一个基因设计4个序列,构建4条慢病毒载体,并进行慢病毒包装,最终提供给
客户病毒浓缩液。
2.客户可提供慢病毒载体,说明载体信息,本公司提供慢病毒包装。
3.检测抑制或超表达效率,约一周。
4.最终提供病毒液滴度至少达到2×108TU/mL,若客户需要浓度更高的病毒液,可提前
说明,最高可提供1×109TU/mL的病毒液。
收费标准
3000元/例
交付期限
3-4周
慢病毒包装价格
慢病毒包装信息由北京吉田生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于慢病毒包装报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。