双向电泳结合质谱服务流程: 蛋白制备及分离、
纯化样品脱盐
去高丰度蛋白
二维电泳(SDS-PAGE、样品制备、样品提取、考染、银染)
图像分析
胶内酶切
MOLDI-TOF-TOF质谱分析(一级质谱:蛋白酶消化、肽指纹图谱鉴定、分子量测定、数据库检索;二级质谱:肽段氨基酸序列)
平台配备大型质谱仪: 1. 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS):主要用于多肽/蛋白质分子量测定及鉴定等。
仪器主要性能:
(1)高通量,每小时可分析400个样品;(2)高灵敏度,离子聚焦透镜技术提高灵敏度;(3)高分辨率的母离子选择;(4)高能CID高效产生碎片离子;(5)亚稳态离子抑制。
服务项目:
(1)分子量测定;(2)溶液内纯蛋白质鉴定;(3)胶内纯蛋白质鉴定;(4)目标多肽分子量和测序。
2. 液相色谱-电喷雾线性离子阱质谱(LC-ESI-LTQ):主要用于蛋白质鉴定,蛋白质混合物分析等。
仪器主要性能:
(1)使用液相色谱与质谱串联,能很好分离多肽混合物,对复杂蛋白质的鉴定很有优势;(2)可进行串联质谱测定MSn;(3)离子扫描速度快,对蛋白质的 鉴定更加迅速和准确;(4)使用自动数据依赖的中性丢失质谱分析可对蛋白质和多肽的磷酸化位点进行分析;(5)灵敏度可达埃摩尔级;(6)自动智能的数据 处理能力。
服务项目:
(1)1D胶条带蛋白质鉴定;(2)溶液内蛋白质鉴定。