鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是需氧的不发酵糖革兰阴性杆菌, 属条件致病菌, 主要引起 医 院 获 得 性 肺 炎, 尤 其 是 呼 吸 机 相 关 性 肺 炎( VAP ), 亦可引 起血流感染、 脑膜炎、 腹膜炎、 伤口感染等多种感染 。
小鼠气管插管操作步骤 :
建立在耳窥镜直视下 小鼠气管插管方法。具体步骤如下:
1、采用1.25%2,2,2 三溴乙醇(25mg/kg)腹腔注射, 待小鼠麻醉后仰卧位固定小鼠于啮齿动物工作台 上。
2、采用门齿环一端钩住小鼠门齿, 另 一端固定于操作台, 缓慢倾斜工作台至45°。
3、操作者右手持直头镊牵拉小鼠舌头, 左手持带电池手柄的耳窥镜, 耳窥镜尖端深入小鼠舌上, 透过耳窥镜的放大镜, 操作者可观察到小鼠的声门 随呼吸而开启 、闭合。 在小鼠声门开启的瞬间, 操作者迅速将已安装气管插管的气管内 导管插入气道, 并退出导管。 将喉镜紧贴气管插管口 , 若喉镜表面有雾气形成表明插管成功。
注射菌液 :
气管插管成功后, 沿气管插管注射10μL鲍曼不动杆菌菌液, 吹打3次, 确保菌液全部进入小鼠肺部。 小鼠在啮齿动物操作台竖立1min后, 缓慢放平操作台, 将小鼠放回饲养笼中。
肺组织细菌定量:
待麻醉小鼠全部苏醒,颈椎脱臼 法处死小鼠, 无菌操作取出 小鼠两肺, 称重后每0.1g肺加入0.9mL生理盐水, 组织匀浆机研磨, 取100μL经系列稀释后接种于 LB 培养基培养16 h 后行菌落计数, 继而计算出 每克肺组织的细菌含量。