刚果红的原理:
刚果红筛选主要是根据菌落降解纤维素,可以形成降解圈,氯化钠冲洗再烘干后可以让降解圈看的更清楚,更易观察、它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.在含有纤维素的培养基中加入刚果红染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明圈。
实验步骤:
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、刚果红染色:切片入刚果红染液1h,自来水洗2min。
3、背景分化:氢氧花钾溶液分化,至阳性斑块明显,背景基本无色,自来水洗。
4、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
结果判读:
淀粉样蛋白呈红色,细胞核呈浅蓝色。
注意事项:
1、区分甲状腺胶质、弹力纤维和胶原纤维,可能都会染成红色;
2、分化时要掌握恰当,分化不足,胶原纤维也呈红色,分化过度,淀粉样变蛋白也可脱色。
晶莱生物病理类实验服务总览表
类别 | 服务项目 | 备注 | 说明 |
制 片 前 处 理 | 石蜡包埋 | 包埋1块 | 固定后组织按客户要求取材,脱水,包埋成蜡块(进口石蜡) |
特殊包埋(细胞、材料、眼球等) | 包埋1块 | 包埋要求难度较高(含特殊位置取材) |
石蜡组织芯片 | 阵列点位包埋 | 客户提供供体蜡块及标本信息 |
软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等) | 1块标本软化 | 较为坚硬组织软化处理 |
骨组织脱钙(小) | 1块标本脱钙 | 最大面≤2cm²骨组织脱钙 |
骨组织脱钙(大) | 1块标本脱钙 | 最大面>2cm²骨组织脱钙 |
骨组织EDTA脱钙(小) | 1块标本脱钙 | 最大面≤2cm²骨组织EDTA脱钙 |
骨组织EDTA脱钙(大) | 1块标本脱钙 | 最大面>2cm²骨组织EDTA脱钙 |
石蜡白片 | 石蜡白片1片 | 组织防脱载玻片石蜡白片 |
冰冻组织制备 | 冰冻包埋及前处理 | 4%多.聚.甲.醛固定的组织或OCT包裹的新鲜组织(-80℃或液氮内保存,干冰运输) |
冰冻切片 | 冰冻组织切片1片 | 同一组织连续切片3张以上免制备费 |
染 色 | HE染色 | 染色含切片 | 苏木.精-伊红染色法,观察组织形态 |
油红O染色 | 染色含冰冻切片 | 4%多.聚.甲.醛固定,冰冻切片。对组织内脂质(如脂滴)染色 |
番红O固绿染色 | 染色含切片 | 常用于植物、软骨组织形态染色 |
Masson染色 | 染色含切片 | 观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度 |
天狼猩红染色 | 染色含切片 | 观察组织纤维化程度,及偏振光进行胶原亚型的分区 |
PAS糖原染色 | 染色含切片 | 观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化;肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化 |
阿利新蓝染色 | 染色含切片 | 常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色 |
甲苯.胺蓝染色 | 染色含切片 | 观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布 |
尼氏染色 | 染色含切片 | 观察脑或脊髓等中枢神经系统内神经元尼氏体的变化 |
LFB髓鞘染色 | 染色含切片 | 观察神经髓鞘的形态及变化 |
普鲁士蓝染色 | 染色含切片 | 常用于吞噬细胞内铁粒子的含量和定位 |
VG染色 | 染色含切片 | 显示组织胶原纤维及肌纤维的形态及变化 |
EVG染色 | 染色含切片 | 观察血管弹性纤维的形态及变化 |
VonKossa染色 | 染色含切片 | 观察组织内病理性钙沉积情况 |
刚果红染色 | 染色含切片 | 一般用于组织淀粉样变染色 |
维多利亚蓝染色 | 染色含切片 | 用于弹力纤维染色 |
免疫 组化 | 免疫组化预式 | 染色含切片 | 试两个一抗浓度后拍照 |
免疫组化正式 | 染色含切片 | 客户提供一抗,常用二抗公司提供 |
免疫组化芯片 | 染色含切片 | 免疫组化组织芯片染色 |
免疫荧光(石蜡-单标) | 染色含切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 |
免疫荧光(石蜡-双标) | 染色含切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 |
免疫荧光(冰冻-单标) | 染色含冰冻切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 |
免疫荧光(冰冻-双标) | 染色含冰冻切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 |
抗体代购 | | 详情请咨询工作人员 |
Tunel | Tunel(POD自带试剂盒) | 染色含切片 | 细胞凋亡染色,客户需提供Tunel试剂盒 |
Tunel(公司提供试剂盒) | 细胞凋亡染色,公司提供罗氏POD Tunel试剂盒 |
凋亡试剂盒代购 | 染色含切片 | 详情请咨询工作人员 |