实验原理
细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受,随着药物浓度的递增,其耐受程度逐渐加强。
动物选择:根据欲建立的耐药细胞株,选择合适的动物。在实验期间,一般选择同性别动物进行实验,动物体重的选择以雌性约17~21 g,雄性约18~22 g 为宜。
瘤株的选择:常见的瘤株均可,应依据研究目的、方向确定实验用瘤株,考虑到传代方便,且容易观察或检测,多选择腹水性肿瘤。 实验流程
- 所试药物的毒性测定:把小鼠随机分成5~8组,每组10~20只小鼠,每只动物每天给予定量的药物,每天1次,连续给药5天,然后观察30天。记录30天内动物的死亡数。药物的剂量应能使动物的死亡率从0~100%。计算LD10及95%的可信限,耐药株建立的最初剂量约为1/6LD10
- 瘤细胞生长测定:用传代第7天的腹水癌细胞给每只动物接种15×106个细胞,7天后处死动物,开腹,收集全部腹水,腹腔用含150 IU的肝素生理盐水冲洗3次。合并腹水及冲洗液进行瘤细胞计数,腹水5 500 g 离心5 min,测定瘤细胞压缩体积。统计不同剂量用药组及对照组的瘤细胞压缩体积,可以测出药物对肿瘤细胞生长的影响。药物剂量一般在LD10时,能完全抑制敏感株肿瘤细胞的生长。
合作流程
- 咨询客服,提供实验方法、内容以及相关实验要求,项目员、技术员对实验项目进行可行性评估。
- 出具项目报价,签订实验服务合同,双方保密协议,出具详细实验方案,客户寄送实验样本和实验试剂。
- 技术员根据实验方案开展预实验,网站个人中心实时更新实验进度,实验完成出具详细实验报告。
实验须知
- 中科赛恩斯生物坚决秉承“严肃严谨、死磕真实、拒绝造假、绝对保密”的科学服务精神,以及严格的契约精神,为您提供优质实验服务。
- 根据客户实验预期效果,进行一定的实验文献检索,重要步骤均使用知名品牌试剂/设备进行每一步的操作质控。
- 严谨的预实验设置,根据说明要求设置参照样本,用2-3种方式进行实验,为正式实验提供最佳实验条件。
- 使用GraphPad 软件作图,并标记显著性,提供.pzf源始文件。分析数据的原始Al文件和导出的.tif图片,提供完整的实验报告(含:实验分组、实验结果、实验结论、实验步骤)。
耐药细胞系细胞功能实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做价格
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