实验原理
细胞划痕(修复)法是一种简捷的测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”,在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口,以及比较图像以确定细胞迁移速率。
在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞的生长迁移能力。
实验通常需设定正常对照组和实验组,实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等的组别,通过不同分组之间的细胞对于划痕区修复能力的不同,可以判断各组细胞的迁移与修复能力。 实验流程
- 种板:用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线;在孔板中加入细胞,培养细胞至汇合度达到90%以上,用枪头比着直尺,垂直于背后的横线划痕。
- 划线:用枪头比着直尺,垂直于背后的横线划痕;用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基放入37℃、5% CO2培养箱培养。
- 拍照分析;对不同时间点不同处理分组的划痕间距进行拍照分析。
合作流程
- 咨询客服,提供实验方法、内容以及相关实验要求,项目员、技术员对实验项目进行可行性评估。
- 出具项目报价,签订实验服务合同,双方保密协议,出具详细实验方案,客户寄送实验样本和实验试剂。
- 技术员根据实验方案开展预实验,网站个人中心实时更新实验进度,实验完成出具详细实验报告。
实验须知
- 中科赛恩斯生物坚决秉承“严肃严谨、死磕真实、拒绝造假、绝对保密”的科学服务精神,以及严格的契约精神,为您提供优质实验服务。
- 根据客户实验预期效果,进行一定的实验文献检索,重要步骤均使用知名品牌试剂/设备进行每一步的操作质控。
- 严谨的预实验设置,根据说明要求设置参照样本,用2-3种方式进行实验,为正式实验提供最佳实验条件。
- 使用GraphPad 软件作图,并标记显著性,提供.pzf源始文件。分析数据的原始Al文件和导出的.tif图片,提供完整的实验报告(含:实验分组、实验结果、实验结论、实验步骤)。
细胞划痕细胞功能实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做价格
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