实验原理
转录组测序，对某一物种或特定细胞在某一功能状态下产生的mRNA进行高通量测序，既可以提供定量分析，检测基因表达水平差异，又可以提供结构分析，能发现未知转录本和稀有转录本，精确地识别可变剪切位点、基因融合、SNP以及Indel位点等，而且不依赖于参考基因组。
人体微生物与疾病关系的研究、分子标志和药物靶点的筛选鉴定等。生物互作、微生物制剂的开发、生物代谢调控研究、微生物活性物质开发等。 实验流程
- 将样本提取总RNA，利用琼脂糖凝胶电泳检测提取效果，并进行质检（OD260/280≥1.9），Nanodrop分光光度计检测RNA浓度和纯度
- 使用oligo dT微珠纯化mRNA片段化处理，之后反转录反应合成双链cDNA，双链DNA末端修复及3’末端加‘A’，使用特定的测序接头连接DNA片段两端，高保真聚合酶扩增构建成功的测序文库。
- 对构建好的文库进行变性，产生单链DNA片段， DNA片段的一端与引物碱基互补，固定在芯片上，另一端随机与附近的另外一个引物互补，也被固定住，形成“桥(bridge)”，进行PCR扩增，产生DNA簇，DNA扩增子线性化成为单链。
- 加入改造过的DNA聚合酶和带有4种荧光标记的dNTP，每次循环只合成一个碱基，用激光扫描反应板表面，读取每条模板序列第一轮反应所聚合上去的核苷酸种类，将“荧光基团”和“终止基团”化学切割，恢复3'端粘性，继续聚合第二个核苷酸，统计每轮收集到的荧光信号结果，获知模板DNA片段的序列。
合作流程
- 咨询客服，提供实验方法、内容以及相关实验要求，项目员、技术员对实验项目进行可行性评估。
- 出具项目报价，签订实验服务合同，双方保密协议，出具详细实验方案，客户寄送实验样本和实验试剂，
- 技术员根据实验方案开展预实验，网站个人中心实时更新实验进度，实验完成出具详细实验报告。
实验须知
- 中科赛恩斯生物坚决秉承“严肃严谨、死磕真实、拒绝造假、绝对保密”的科学服务精神，以及严格的契约精神，为您提供优质实验服务。
- 根据客户实验预期效果，进行一定的实验文献检索，重要步骤均使用知名品牌试剂/设备进行每一步的操作质控。
- 严谨的预实验设置，根据说明要求设置参照样本，用2-3种方式进行实验，为正式实验提供最佳实验条件。
- 使用GraphPad 软件作图，并标记显著性，提供.pzf源始文件。分析数据的原始Al文件和导出的.tif图片，提供完整的实验报告（含：实验分组、实验结果、实验结论、实验步骤）
转录组测序实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做价格
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