实验原理
Western Blot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过凝胶电泳分离细胞或者组织样本中的蛋白，经转膜、封闭后目标蛋白与特有性一抗结合，再与辣根过氧化物酶（HRP）标记的第二抗体起反应，经过底物显色，分析曝光条带的位置和灰度分析获知目标蛋白在样本中的表达情况。该法结合了凝胶电泳和固相免疫测定两种技术的高特异性和高敏感性，可以对目标蛋白进行定型和半定量的分析。
Western免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是凝胶电泳，被检测物是蛋白质，探针是抗体，显色用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。 实验流程
- 间接检测：加入未标记的第一抗体与抗原结合后，用酶/荧光团标记的二抗来检测一抗，染色显影后对目的蛋白进行分析。
- 直接检测：用酶/荧光团缀合的一抗检测印迹上的目的抗原，分析着色的位置或深度获得该蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况。
合作流程
- 咨询客服，提供实验方法、内容以及相关实验要求，项目员、技术员对实验项目进行可行性评估。
- 出具项目报价，签订实验服务合同，双方保密协议，出具详细实验方案，客户寄送实验样本和实验试剂。
- 技术员根据实验方案开展预实验，网站个人中心实时更新实验进度，实验完成出具详细实验报告。
实验须知
- 中科赛恩斯生物坚决秉承“严肃严谨、死磕真实、拒绝造假、绝对保密”的科学服务精神，以及严格的契约精神，为您提供优质实验服务。
- 根据客户实验预期效果，进行一定的实验文献检索，重要步骤均使用知名品牌试剂/设备进行每一步的操作质控。
- 严谨的预实验设置，根据说明要求设置参照样本，用2-3种方式进行实验，为正式实验提供最佳实验条件。
- 使用GraphPad 软件作图，并标记显著性，提供.pzf源始文件。分析数据的原始Al文件和导出的.tif图片，提供完整的实验报告（含：实验分组、实验结果、实验结论、实验步骤）。
Western Blot蛋白免疫印迹表达检测实验服务生物实验动物实验整体课题外包代做价格
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