Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
Southern Blot实验流程
1、制备待测DNA
2、DNA限制酶消化
3、琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品
4、电泳凝胶预处理
5、转膜
6、探针标记
7、预杂交
8、Southern杂交
9、洗膜
10、 自显影检测
11、实验结果分析及报告
实验交付:
1、DNA样品检测报告(实验样品不返还,请注意保留备份)
2、标准实验流程报告
3、实验结果检测报告。
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