杂交瘤细胞系
 

       双特异性抗体（bispecific antibody,BsAb）,拥有两个不同的抗原结合位点，从而同时与两个靶抗原结合，在发挥抗体靶向性的同时，介导另外一种特殊的功能，例如一个结合靶细胞上的特异抗原，另一个结合淋巴细胞或者吞噬细胞等效应细胞，从而在肿瘤诊断及治疗过程中发挥传统抗体无法比拟的优势。双特异性抗体是一种工程化的抗体类蛋白产物，在自然情况下是不会产生的，只能通过化学或者生物学的方法来制备，利用DNA重组及细胞融合的技术来实现。通过杂交瘤细胞系来制备双特异性抗体是最早使用的一种方法，在目前也常用来制备单克隆抗体药物开发。但是这种技术有天然的缺陷，由于重链和轻链的随机重组，两种针对不同抗原的抗体重组有以下10种形式，但只有一种是需要的。
 

艾柏森生物提供双特异性抗体定制服务，可以满足客户不同的需求。

技术流程

1.选择标记物的引入：杂交瘤细胞系需要引入突变以便筛选。HAT敏感的杂交瘤细胞能在含有8-氮鸟嘌呤药物的培养基中存活。
2.流式细胞仪筛选杂交瘤细胞
3.细胞融合：使用聚乙二醇或者电诱导细胞融合。
4.从杂交瘤培养液中筛选特异性抗体：ELISA，流式细胞仪和细胞毒性是最常用的筛选方法
5.克隆：筛选稳定分泌bsAb的细胞系，再进行单克隆细胞培养，最常用的方法为有限稀释法。
6.双特异性抗体的纯化：通常使用蛋白A或蛋白G亲和色谱法与离子交换色谱或排阻色谱合并来纯化双特异性抗体，bsAb的纯度可以通过SDS-PAGE，等电聚焦，Western-blot，同型特异性的ELISA来评估。
 
相关服务: 

Bispecific IgGs
Knobs-Into-Holes
Bispecific Antibody Analysis
Stable Cell Line Construction Services
Manufacturing Cell Line Development