制作原理

      TALEN(Transcription Activator-Like Effector Nuclease) 技术是基于对DNA识别的TALEN臂和人工改造的核酸内切酶的切割域(FokⅠ)的结合对细胞基因组进行修饰而实现的。TALEN的DNA识别域是由一些非常保守的重复氨基酸序列模块组成，每个模块由34个氨基酸组成，其中第12和13位的氨基酸种类为可变的（RVDs），且决定了该模块识别靶向位点的特异性。通过DNA识别域结合到靶位点上，以及FokI的切割域形成二聚体后，可特异性对目标基因DNA实现切断。在非同源末端连接修复过程中，DNA双链断开后会由于碱基的随机增减造成目标基因功能缺失。 该技术目前已成功应用于植物、细胞、酵母、斑马鱼及大、小鼠等各类模式动物的研究领域。

服务流程和周期

TALEN技术流程图

      TALEN由四部分组成：N端序列，RVD，C端序列，FokI。利用Type II 限制性内切酶可以将RVDs模块分别生成不同的粘性末端，同时又不留有酶切位点， 通过一系列的相应酶切连接反应实现RVDs与TALEN骨架的无缝连接。
      TALEN系统利用FokI的内切酶活性打断目标基因。FokI形成二聚体发挥活性，在TALEN结合臂的引导下，发挥特异性内切酶活性，在两个靶位点之间剪切DNA，形成DSB（Double- Strand Breaks）,诱发DNA损伤修复机制。细胞通过NHEJ（Non- homologous End Joining）修复DNA，在此修饰过程中导致删除或插入了一定数目（非3的倍数）的碱基，造成移码，形成对目标基因特异性KO的突变体。

TALEN技术特点

1、可以应用于大小鼠，无动物品系限制；

2、修饰效率可达90%以上；

3、实验周期短、价格低。

服务类型

1、全身性基因敲除

2、点突变

3、小片段基因敲入

建系原则与流程

1、TALEN技术获得的基因敲除鼠，由于是在大鼠或者小鼠的鼠原核受精卵期进行的修饰，获得的F0鼠一般也是杂合子，并且每只FO鼠由于移码突变情况可能不一样，所以每只F0鼠也需要作为一个独立的谱系进行传代； 

2、原核显微注射获得测序鉴定阳性的F0代杂合子鼠，F0代杂合子鼠与野生型鼠进行交配，获得测序鉴定阳性的F1代杂合子鼠（可能有多种突变类型的F1）；

3、选择来自同一只F0代鼠，突变类型一致的F1代鼠，达到性成熟后与进行同胞交配，可获得F2代鼠。对交配获得的F2代鼠进行PCR及测序鉴定，理论上， F2代鼠中25%为相同突变型的纯合子鼠，有50%为只有一条染色体突变的杂合子鼠，有25%为野生型鼠。

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公司简介

赛业生物科技集团是全球领先的多元化跨国生物科技实体，2006年成立于美国，中国区总部设立在广州，并在苏州设有分公司，北京、上海、武汉、重庆等地均有办事处。目前员工人数达400余名，总规模超22000平方米，业务经营范围涵盖模式动物、细胞生物学、分子生物学、生物信息学等生命科学领域的多个分支学科。

作为全球领先的基因敲除和转基因模式动物商业技术平台，赛业生物拥有10000平米实验动物中心，动物种群规模超过10万只，每年可构建基因敲除及转基因鼠模型10000例以上，学术引用累计超过700篇并多次发表在Nature、Nat Cell Biol、Genome Res等顶尖期刊。通过ISO9001:2008与AAALAC国际认证，确保向广大科研学者提供的技术服务严格符合国际标准。

专家团队介绍 

欧阳应斌 博士（赛业生物技术副总裁、高级科学家）

        欧阳应斌博士，国际知名的分子生物学和模式动物专家，1993年于军事医学科学院博士毕业后，二十多年来一直身居美国致力于分子生物学和基因工程模式 动物研究，先后就任于Indiana大学医学院、Oklahoma医学研究基金会和美国首屈一指的模式动物商业机构Taconic生物科技公司。
        目前任职于跨国生物技术实体Cyagen Biosciences（赛业生物科技），担任技术副总裁和高级科学家，由其率领的科学家团队数年来成功开发了上千种转基因、基因敲除/敲入小鼠及大鼠实 验动物及疾病模型。在PNAS、JBC等高水平杂志发表论文10余篇，由其提供的技术服务被Nature等国际顶尖杂志直接引用达数百次之多。

俞晓峰 博士（赛业生物技术总监、高级科学家） 
        俞晓峰博士，国际知名模式动物和细胞生物学专家，1995年军事医学科学院博士毕业，2000年起任耶鲁大学医学院研究员。2003至2009年期间 任职于美国 iTL 基因打靶公司，作为资深科学家和项目经理，负责基因工程小鼠模型研发方案与策略的设计，项目的管理，技术人员的指导与培训等工作。2007年起负责开发了 人源化 p53 基因不同点突变的肿瘤小鼠模型库项目。2009年起任纽约大学医学院研究员。

TALEN基因敲除/敲入鼠价格

TALEN基因敲除/敲入鼠信息由赛业（苏州）生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于TALEN基因敲除/敲入鼠报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。