一、技术原理 
        传统的基因打靶技术制备基因敲除（KO）/敲入（KI）基因打靶技术是建立在DNA同源重组与胚胎干细胞等技术基础上的分子生物学技术。
        同源重组是指当外源DNA片段与宿主基因组片段同源性高时，同源DNA区部分可与宿主DNA的相应片段发生交换（即同源重组）。
        基因打靶就是通过同源重组技术将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的。基因打靶技术目前已被广泛认为是一种理想的特定修饰与改造生物体遗传物质的zei佳方法。尤其是条件性和诱导性基因打靶系统的建立，使得对基因在时间和空间上的靶位修饰更加明确、效果更加精确可靠， 该技术的发展已经为发育生物学、分子遗传学、免疫学及医学等学科提供了一个全新的、强有力的研究和治疗手段，并已显示出巨大的应用前景及商业价值。
 

二、服务流程和周期

三、小鼠品系 
        ES 细胞品系：129 （agouti）、C57BL/6N（black)、C57BL/6（agouti）。

四、 服务承诺 
        赛业生物科技承诺提供不少于4只F1代杂合子小鼠。

五、基因打靶常用小鼠模型 
（1）完全性基因敲除小鼠（Conventionai Knockout， KO） 
        完全性基因敲除是通过基因敲除技术，把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或者功能区域敲除掉，获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。
       应用：用于研究某个基因（要求该基因非胚胎致死性基因）对全身生理病理的功能。
 
（2）条件性基因敲除小鼠（Conditional Knockout， CKO） 
        条件性基因敲除是通过基因敲除把两个loxp位点放到目的基因一个或几个重要的外显子的两端制备出floxed小鼠， 该floxed小鼠在与表达Cre酶小鼠杂交之前，该目的基因表达完全正常，而当该floxed小鼠与组织特异性表达Cre酶的小鼠进行杂交后，可以在特定的组织或细胞中敲除该基因，而该基因在其它组织或细胞表达正常。
       应用：用于具有胚胎致死性目的基因的研究；用于研究基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能；与控制Cre或Flp表达的其它诱导系统相结合，还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。
 
（3）基因敲入小鼠（Knockin， KI） 
        基因敲入可以在目的基因位置引进特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变(模拟人类遗传疾病模型) ；或将报告基因(如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等)通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点，从而可以通过报告基因的表达跟踪目标基因的表达。通过报告基因的表达可以研究基因的表达谱。也可以用报告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI同时发生。
       应用：用于药物筛选相关研究；用于信号通路的研究；用于示踪的相关研究。
 
（4）人源化小鼠（Humanized ） 
        人源化小鼠模型是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型。这种模型通常被用于人类疾病体内研究(in vivo study)的活体替代模型。由于人类生理与动物生理有显著的差别，利用动物模型得到的实验结果有时不能适用到人体上。比如，有些利用小鼠等动物模型开发的药物在人体上并没有效果。所以，利用转基因或同源重组的方法，将人类基因“放置”在小鼠模型上所制备的人源化小鼠模型，大大提高了这类小鼠模型作为模拟某些人类疾病的有效性。
       应用：在艾滋病、癌症、传染病、人类退化性疾病、血液病研究领域等都有广泛的应用；药物临床前模拟实验。
 
（5） KO First 基因敲除小鼠 
        KO-First技术是通过在内含子中插入一个两边带有FRT位点的基因破坏盒来达到敲除的目的，这个破坏盒含有Splice acceptor，报告基因和Neo。除此之外，在目的基因敲除的外显子两侧各插入两个LoxP位点。因此得到的小鼠是目的基因敲除同时敲入报告基因与抗性基因的小鼠。通过灵活选择Cre/LoxP重组系统或者Flp/FRT重组系统，可达到同时获得完全性敲除和条件性敲除的实验目的。即当该小鼠与表达Cre的小鼠交配时，可获得目的基因敲除同时敲进报告基因的小鼠；当该小鼠与Flp小鼠交配时，可还原已敲除基因的表达，获得基因条件性敲除小鼠，在此基础上Cre小鼠交配又可获得目的基因敲除小鼠。
 


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公司简介

赛业生物科技集团是全球领先的多元化跨国生物科技实体，2006年成立于美国，中国区总部设立在广州，集团成员包括 Cyagen Bioscience Inc.、赛业（广州）生物科技有限公司、赛业（苏州）生物科技有限公司、赛业健康研究中心（太仓）有限公司等。目 前员工人数达400余名，总规模超22000平方米，业务经营范围涵盖模式动物、细胞生物学、分子生物学、生物信息学、体外诊断等生命科学领域的多个分支 学科。

作为全球领先的转基因/基因敲除模式动物商业技术平台，赛业模式动物中心动物种群规模超过10万只，每年可构建基因敲除鼠模型500例、转基因 鼠模型5000例以上，学术引用累计超过600篇，是目前国际上zei主要、zei被认可的基因工程模式动物商业服务平台之一。自主开发的全球首款功能强大的在线 载体设计工具VectorBuilder，每年可定制载体超30万个，彻底颠覆生物技术领域传统格局，打造载体构建金标准和新模式。

2009年，赛业通过ISO9001:2008认证并于2012年顺利通过复审，确保向广大专家学者提供的所有产品和技术服务符合国际标准。 AAALAC认证的顺利通过，使赛业成为华南地区极少数个获得国际实验动物评估和认可委员会国际认证的单位之一。这不仅是实验动物质量和生物安全水准的象 征，更是国际前沿医学研究的质量标志。

赛业公司目前在美国加州Santa Clara 建立起活体实验鼠检测、隔离中心，成为国内唯一一家具有活体实验鼠类出口能力的生物企业；通过国家出入境检验检疫部门的考核，成为华南地区第一家生物材料 出入境绿色通道试点单位，加速了实验动物出入境审批流程，并进一步提升了赛业模式动物中心国际服务的能力。

目前公司的产品和技术服务已为全球数百个顶尖生命科学实验室和跨国制药公司提供了帮助，秉承着“为生物科技创造无限可能”的企业愿景服务于全世界的科研学者！

专家团队介绍 

欧阳应斌 博士（赛业生物技术副总裁、高级科学家）

 
        欧阳应斌博士，国际知名的分子生物学和模式动物专家，1993年于军事医学科学院博士毕业后，二十多年来一直身居美国致力于分子生物学和基因工程模式 动物研究，先后就任于Indiana大学医学院、Oklahoma医学研究基金会和美国首屈一指的模式动物商业机构Taconic生物科技公司。

        目前任职于跨国生物技术实体Cyagen Biosciences（赛业生物科技），担任技术副总裁和高级科学家，由其率领的科学家团队数年来成功开发了上千种转基因、基因敲除/敲入小鼠及大鼠实 验动物及疾病模型。在PNAS、JBC等高水平杂志发表论文10余篇，由其提供的技术服务被Nature等国际顶尖杂志直接引用达数百次之多。

俞晓峰 博士（赛业生物技术总监、高级科学家） 
 
        俞晓峰博士，国际知名模式动物和细胞生物学专家，1995年军事医学科学院博士毕业，2000年起任耶鲁大学医学院研究员。2003至2009年期间 任职于美国 iTL 基因打靶公司，作为资深科学家和项目经理，负责基因工程小鼠模型研发方案与策略的设计，项目的管理，技术人员的指导与培训等工作。2007年起负责开发了 人源化 p53 基因不同点突变的肿瘤小鼠模型库项目。2009年起任纽约大学医学院研究员。

        2010至2013年期间担任美国 ASC 生物技术公司研发部总监，模型生物服务部总监，以及斯坦福生物公司总裁等职务，目前任职于跨国生物技术实体Cyagen Biosciences（赛业生物科技），担任技术总监和高级科学家。俞博士在遗传工程小鼠领域有超过 15 年的开发和管理经验，在干细胞相关领域和哺乳动物细胞系基因改造研究也取得了巨大成就，其研究成果多次发表在Hum Mol Genet.、Mol Cell Biol.、Mol Cell Biol.、J. Biol. Chem.等高水平杂志上。

传统基因打靶载体制备基因敲除价格

传统基因打靶载体制备基因敲除信息由赛业（苏州）生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于传统基因打靶载体制备基因敲除报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。