应用文献

转染剂 PEIpro 分析


聚乙烯亚胺 (PEIpro) 是一种聚合物转染试剂,能够使 DNA 缩合为带正电荷的微粒。这些微粒可以黏合到带负电荷的细胞表面残基,通过胞吞作用进入细胞;然后 PEIpro 与 DNA 形成的复合物经过渗透膨胀进入细胞质;在复合物裂解后,DNA 即可自由地融合到细胞核中。因此,PEIpro 在基因治疗药物的开发与生产中,可通过瞬时基因表达生产重组蛋白质。PEIpro还可以使在无血清培养基中培养的贴壁细胞系用于病毒载体生产(慢病毒、腺病毒、腺相关病毒等)。但是,PEIpro 具有很强的细胞毒性,可能破坏细胞膜而导致细胞死亡,或在胞吞后破坏线粒体膜而导致细胞凋亡。因此,随着基因治疗药物的快速发展,准确测定溶液中转染剂 PEIpro 的含量具有重要意义。我们建立了简单高效的 HPLC 方法测定 PEIpro 的含量,可以解决生物制药质量控制方面的后顾之忧。

PEIpro 带有较强的正电荷,考虑用体积排阻色谱法 (SEC) 将其进行分离,同时 PEIpro 没有紫外吸收的化学结构,柱后选择 ELSD作为检测器对其进行准确测定。




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