在克隆一个基因后的下一步,往往是将其导入不同类型细胞,以分析其表达,测定表达对细胞生长的影响,或将高表达的基因产物纯化。将外源DNA导入哺乳动物细胞有两种途径:稳定(永久)或暂时性转染。稳定转染的目的是将转移基因整合到细胞染色体DNA上,形成稳定表达转移基因的细胞系。一般需要共转染一个选择标记,用于追踪转染成功的细胞或转染效率。...
T细胞的CRISPR编辑实验方案1.T细胞受体特异性gRNA设计在人体内,T细胞受体(TCR)由TRA和TRB基因分别编码的α链和β链组成。实验方案描述的TCR敲除应用数据,选择TCR α或β恒定区(TRAC或TRBC)内的两个靶点。化学合成的gRNA相比体外转录的mRNA细胞毒性更小,修饰后的RNA稳定性更高。...
本实验建立小鼠严重烫伤模型,通过采用慢病毒(购自上海吉凯基因公司)转染的方式稳定有效地下调了和上调了DC细胞中TIPE2表达,观察其对DC免疫功能的影响。该研究通过动物体内和体外实验旨在明确TIPE2对DC介导T淋巴细胞免疫抑制功能的影响,为寻求严重感染并发症的防治途径提供新思路。通过采用慢病毒(购自上海吉凯基因公司)转染的方式稳定有效地下调了和上调了DC细胞中TIPE2表达。...
该方法的转化效率通常很低。 脂质体染法 指质体能在体内或体外提供运载外源性遗传物质进入细胞的载体。脂质体介导的基因转移的最大优势在于能在活体内应用。 受体介导的基因转移 依靠受体介导的细胞内吞途径以转移外源基因。受体介导的基因转移方法是在质粒DNA和某种特异的多肽(配体)之间形成复合体,而这种多肽能为细胞表面的肥体所识别。...
Copyright ©2007-2022 ANTPEDIA, All Rights Reserved
京ICP备07018254号 京公网安备1101085018 电信与信息服务业务经营许可证:京ICP证110310号