最重要的是,必须注意选择实验条件以保持膜蛋白在整个纯化过程中处于活性状态。这一点怎么强调也不过分,因为很多 GPCR—旦被去污剂从质膜中提取出来就会变得不稳定。二、蛋白质增溶的一般注意事项提取嵌膜受体需要使用去污剂(详见第34章)。去污剂的正确选择对于长时间维持溶解受体的活性状态非常关键。]...
为进行有效的沉淀,务必使终末反应混合液中 EDTA-Tris-DNA 溶液的离子成分占优势,混合液的终体积与放射性标记寡核苷酸的浓度对本方法的效率不产生影响。 2. 加入足量的 1%CPB, 使离心管中混合液的去污剂浓度达到 0.1%, 充分混匀。 3. 将离心管置于干冰/乙醇浴中至混合液冻结。从冰浴中取出离心管,室温下使混合液融化。...
这个浓度的咪唑去除了结合于 Ni2-NTA 树脂的绝大部分大肠杆菌的污染物,但不会洗脱目的融合蛋白。...
如果可能,不要使用挤压瓶或浸湿的布,使用喷雾器将溶液喷洒至模块反应孔内。● 使用漂白溶液处理后,用去离子水彻底冲洗样品加热模块。注:用水清除仪器表面残留的漂白溶液,使漂白处理的长期效应最小化。如果样品加热模块受到放射性污染,则使用市售去污剂产品清除污染。如果无法去除模块污染,不可将仪器送回厂家维修。清洁加热盖每个月清洁加热盖一次,亦可根据需要进行清洁。注意!...
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