液相色谱-串联质谱法测定尿液中的内源性类固醇激素
来源：现代科学仪器网
摘要： 建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定尿液中的内源性类固醇激素的方法。尿样经葡萄糖醛酸甙酶酶解后进行液-液提取,以甲醇-0.1%甲酸缓冲液(含0.02mol/L乙酸铵)(体积比为68∶32)为流动相,采用CosmosilC18色谱柱分离,并以三重四极杆串联质谱多反应监测扫描方式对尿样中的脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮、表睾酮、雄酮和苯胆烷醇酮等5种激素进行检测。方法的最低检出限为0.01~10ng/mL,平均回收率为96.7%~106.5%,日内和日间相对标准偏差(RSD)分别小于7%和11%。应用所建立的方法测定了健康志愿者口服DHEA后尿液中内源性类固醇激素的变化情况,结果表明该方法样品处理简便,色谱分离完全,结果准确可靠,可替代气相色谱-质谱法用于体液中内源性类固醇激素兴奋剂的常规分析。
自上世纪50年代以来,合成类固醇激素始终是一些运动员最常滥用的兴奋剂,其中内源性类固醇激素为滥用之首[1]。因此,内源性类固醇激素的检测及判定是近年来研究的热点。内源性类固醇是自身合成的激素,包括睾酮、表睾酮、脱氢表雄酮(dehydroep iandrosterone,DHEA)、雄酮以及苯胆烷醇酮等。其中DHEA是多种类固醇激素的重要前体,它在体内可通过多种途径代谢为雄酮、苯胆烷醇酮以及睾酮等不同的内源性类固醇激素[2,3],并且在代谢为睾酮的同时并不会升高睾酮与表睾酮的浓度比(这是判定是否服用外源性睾酮制剂的标准[4,5])
