HPLC肽谱图

上一篇 / 下一篇  2008-08-01 15:10:03/ 个人分类:蛋白质(多肽)药物理化分析

原理:样品蛋白先经过酶解后进入HPLC,通过反相色谱柱根据肽段的不同保留时间进行分离,得到HPLC肽谱图。
 
Agilent HPLC 1090 /Agilent HPLC 1100
 
样品要求:
样品纯度>90%; 浓度>1mg/ml(或者每批浓度一致);总体积>1ml
缓冲液最好为50-100mmol NH4HCO3(pH 7.8-8.0)或其他易挥发性缓冲液
 
实例分析:
仪器名称:高效液相色谱HP1090
试验条件:
酶种类:dequencing-trypsin(promega)
色谱柱类型:CTI (USA) C18, 2.1mm×50mm (214nm)
洗脱条件:流动相 A 液:0.1%TFA  99%H2O;B液:0.1%TFA  80%ACN
               洗脱方式:0-5min 10%B液,5-65min 10-100%B液
 
某样品HPLC的肽谱图

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TAG: pmf肽指纹图谱

 

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