色谱法及其分类

一. 色谱法

色谱法：根据各物质在两相中的分配系数(表示溶解 或 吸附的能力)不同而进行分离、分析的方法。

各组分被分离后，可进一步进行定性和定量分析：

经典：分离过程和其含量测定过程是离线的，即不能连续进行

现代：分离过程和其含量测定过程是在线的，即 能连续进行

经典色谱法：将潮湿的碳酸钙挤出玻璃管，用刀将各色带切下，用适宜的方法进行分析;

现代色谱法：当一个两组分(A和B)的混合物样品在时间t1从柱头加入，随着流动相不断加入，洗脱作用连续进行，直至A和B组分先后流出柱子而进入检测

器，从而使各组分浓度转变成电信号后在荧光屏上显示出来。

根据峰的位置(出峰时间 t ) ——定性

根据峰的面积 A (或峰高h) ——定量

二. 色谱法分类

(一)按两相物理状态分

1. 气相色谱法 (gas chromatography 简称 GC)用气体作流动相的色谱法。

2. 液相色谱法 (liquid chromatography 简称 LC)用液体作流动相的色谱法。

3. 超临界流体色谱法 (SFC)

用超临界状态的流体作流动相的色谱法。

超临界状态的流体不是一般的气体或流体 , 而是临界压力和临界温度以上高度压缩的气体 , 其密度比一般气体大得多而与液体相似 , 故又称为 “ 高密度气相色谱法 ”

(二)按分离原理分

1. 吸附色谱法( adsorption chromatography )：

根据吸附剂表面对不同组分物理吸附能力的强弱差异进行分离的方法。

如：气一固色谱法、液-固色谱法——吸附色谱

2. 分配色谱法 (partition chromatography )：

根据不同组分在固定相中的溶解能力和在两相间分配系数的差异进行分离的方法。

如：气-液色谱法、液-液色谱法——分配色谱

3. 离子交换色谱法(ion exchange chromatography )

根据不同组分离子对固定相亲和力的差异进行分离的方法。

4. 排阻色谱法( size exclusion chromatography)：

又称凝胶色谱法 (gel chromatography ),

根据不同组分的分子体积大小的差异进行分离的方法。

其中：以水溶液作流动相的称为凝胶过滤色谱法 ;以有机溶剂作流动相的称为凝胶渗透色谱法。

5. 亲合色谱法 (affinity chromatography)

利用不同组分与固定相共价键合的高专属反应进行分离的方法。

(三)按固定相的形式

1. 柱色谱法(column chromatography )：

固定相装在柱中 , 试样沿着一个方向移动而进行分离。

包括 填充柱色谱法：固定相填充满玻璃管和金属管中

开管柱色谱法：固定相固定在细管内壁(毛细管柱色谱法)

2. 平板色谱法 (planer chromatography )：

固定相呈平面状的色谱法。

包括 纸色谱法： 以吸附水分的滤纸作固定相;

薄层色谱法：以涂敷在玻璃板上的吸附剂作固定相。