显微镜的构造和使用方法

上一篇 / 下一篇  2008-08-28 10:29:57/ 个人分类:实验技术

[目的要求]

1、学习了解显微镜构造、成像原理及其使用方法。

2、学习临时装片及绘制生物图的方法。

[材料用品]

显微镜、载玻片、盖玻片、小烧杯、滴管、尖咀镊子、滤红条、水绵营养体。

[方法与步骤]

一、显微镜的构造

显微镜的种类很多,我们常用的为普遍光学显微镜。显微镜可分为两个部分:机械部分和光学部分。

(一)机械部分

1、镜座 为显微镜最下面的马蹄形铁座。其作用是支持显微镜的全部重量。使其稳立于工作台上。

2、镜柱 镜座上的直立短柱叫做镜柱。

3、镜臂 镜柱上方的弯曲的弓形部分叫做镜臂,是握镜的地方。镜臂和镜柱之间有一个能活动的倾斜关节,可使显微镜向后倾斜,便于观察。

4、镜筒 安装在镜臂上端的圆筒叫做镜筒。镜筒长度一般为160毫米,上端安装目镜,下端连接转换器。

5、转换器 镜筒下端的一个能转动的圆盘叫做转换器。其上可以安装几个接物镜,观察时便于调换不同倍数的镜头。

6、载物台 镜臂下端安装的一个向前伸出的平面台叫做载物台。用于放置观察用的玻片标本,载物台中央有一圆孔,叫通光孔。通光孔左右两旁一般装有一对弹簧夹,为固实玻片之用,有的装有移片器,可使玻片前后左右移动。

7、准焦螺旋 镜臂上装有两种可以转动的螺旋,能使镜筒上升或下降,称为准焦螺旋。大的螺旋转动一圈。镜筒升降10毫米,用于调节低倍镜,叫做粗准焦螺旋。小的螺旋围动一圈,镜筒升降0.1毫米。主要用于调节高倍镜,叫做细准焦螺旋。

(二)光学部分

1、反光镜 位于马蹄形镜座之上方。一个可以转动的圆镜,叫做反光镜。反光镜具两面,一面为平面镜,一面为凹面镜。其用途是收集光线。平面镜使光线分布较均匀。凹面镜有聚光作用,反射的光线较强,一般在光线较弱时使用。

2、集光器 位于载物台下方。由二、三块透镜组成,其作用是聚集来自反光镜的光线,使光度增强,并提高显微镜的鉴别力,集光器下面装有光圈(可变光阑),由十几张金属薄片组成,可以调节进入集光器光量的多少。若光线过强,则将光圈孔口缩小,反之则张大,集光器还可以上下移动,以调节适宜的光度。

3、接物镜 又称物镜,由数组透镜组成,安装在转换器上,能将观察的物体进行第一次放大,是显微镜性能高低的关键性部件。每台显微镜上常备有几个不同倍数的物镜,物镜上所刻8×、10×、40×等就是放大倍数,习惯上把10-20倍的叫做低倍物镜;40-60倍的叫帮高倍物镜;90-100倍的叫做油镜。从形态上看,接物镜越长,放大倍数越高。

4、接目镜 又称目镜,由二、三片透镜组成,安装在镜筒上端,其作用是把物镜放大的物体实像进一步放大。在目镜上方刻有5×、10×、20×等为放大倍数。从外表上看,镜头越长放大倍数越低。

显微镜的放大倍数,粗略计算方法为接目镜放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。如观察时所用接物镜为40×、接目镜为10×,则物体放大倍数为40×10=400倍。

二、显微镜的成像原理

显微镜的光学系统中,有两组重要的透镜,一组是接目镜。这两组透镜虽然结构很复杂,但它们的作用都相当于一个凸透镜。凸镜的成像原理,也就是显微镜放大成像的光学原理。只不过是通过两次放大而已,其成像原理和光路图如图所示。

接物镜的焦距较短,会聚能力较强,接目镜的焦距较长,会聚能力较弱。物体AB必须放在物镜(O1)的下焦点F1之外而小于二倍焦距(2f)的地方,这样就在物镜(O1)上方形成一个倒立的放大实像A1B1。这个实像正好位于目镜(O2)下焦点F2之内。而且距焦点F2极近的位置。A1B1通过目镜(O2)折射放大后形成一个放大的虚像A2B2。这个虚像A2B2相对于原来的物体AB来说,它是一个倒立而放大的虚像。

三、显微镜的使用步骤进行

1、安放 安放显微镜要选择临窗或光线充足的地方。桌面要清洁、平稳,使用时先从镜箱中取出显微镜。右手握镜臂,左手托镜座,轻放桌上,镜筒向前,镜臂向后,然后安放目镜和物镜。用纱布拭擦镜身机械部分。用擦镜纸或绸布试控光学部分,不可随意用手指试擦镜头,以免影响观察效果。

2、对光 扭转转换器,使低倍镜正对通光也,打开聚光器上的光圈,然后左眼对准接目镜注视,右眼睁开,用手翻转反光镜,对向光源,光强时用平面镜,光较弱时用凹面镜。这时从目镜中可以看到一个明亮的圆形视野,只要视野中光亮程度适中,光就对好了。

3、放玻片 将要观察的玻片标本,放在载物台上,用弹簧夹或移光器将玻片固定。将玻片中的标本对准通光孔的中心。

4、调焦 调焦时,旋转粗焦螺旋,为了防止物镜与玻片标本相撞。先慢慢降低镜筒,降低时,必须从侧面仔细观察,直到物镜与玻片标本相距5mm以上,切勿使物镜与玻片标本接触,然后一面用左眼自目镜中观察,一面用右手旋转粗准焦螺旋(切勿弄错旋转方向),直到看清标本物像为止。

5、观察 对光、调焦都是用的低倍物镜。观察时,还是先用低倍物镜,焦距调准后,移动玻片标本,全面的观察材料,如果需要重点观察的部分,将其调至视野的正中央,再转换高倍镜进行观察。转换高倍镜后,只有轻轻扭转细准螺旋,就能看到清晰的物像,注意使用高倍镜时,切勿使用粗准焦螺旋,否则容易压碎盖玻片并损伤镜头的透镜。一般凡是用低倍物镜能够观察清楚的标本,就不一定要换用高倍镜。

观察完毕,扭转转换器,使镜头偏于两旁,降下镜筒,擦抹干净,装入镜箱。

四、临时装片

将要观察的材料放在载玻片的水滴中,加盖盖玻片,以备显微镜下观察,这种方法叫做临时装片,临时装片的优点在于,新鲜材料组织不会破坏,可保持原来生活状态,同时操作简便,不受设备条件限制,随时随地可以进行。

制作临时装片时首先将载玻片,盖玻片擦拭干净[注意试擦玻片动作要轻,手指用力要均匀,否则易试破]。在载玻片中央,滴加一、二滴清水。然后用镊子防水绵少许,放在载玻片上,再将盖玻片轻轻盖上,注意:为了不使其内有气泡,必须将盖玻片先从一侧放下,使接触到水,然后慢慢放下,如仍有气泡,可用镊子轻轻加压盖玻片,或者解剖针对盖玻片稍为提高,然后再放下,水不能过多,水量过多,则盖玻片易浮动,这时可用小滤纸条将水分吸干,如水分过少,水没有填满盖玻片,可以侧面用滴管加水少许。总之,应使盖玻片紧贴载玻片,不能浮动,这样才利用观察。

最后试干玻片四周的水分,置显微镜下观察。

临时装片技术,是本课程实验课最常用的基本技术,要求每个同学反复练习,熟练掌握。

五、生物绘图法

生物实验图不同于一般美术图,也不同于机械制图。生物绘图要求将标本的外形和内部结构准确的措施下来,然后详加说明,要求形象自然,比例适当,线条清晰。

生物绘图一般用点、线表示,轮廓用线条描绘,明暗程度、物质含量多少等则用细点的蔬密表示之,图纸应选择能够用橡皮试擦的上好白纸,绘图时先用中软(EB)铜笔绘出轮廓,然后用较硬(3H)的铅笔绘出全图,图中各部分应注字说明,图与字之间用水平细线连系之,图的标题填在图的下方。

很多细不生物体或解剖结构是通过显微镜观察认识的。因此要逐步训练用左眼观察,右眼看图纸。将观察结果准确地描绘出来。


TAG: 使用显微镜构造

 

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