维生素B4原料及片剂均收载于卫生部药品标准中，含量测定一直采用凯氏定氮法，该方法较为繁琐费时。维生素现在紫外区有吸收，且已用于原料药的鉴别，但尚未见用于测定片剂含量的报道。我们试用紫外分光光度法测定维生素B4片的含量，方法简便、可靠。
1 仪器、试剂与药品
L‘V一265紫外分光光度计(日本岛津)，维生素B4对照品(浙江海正药业有限公司生产，经重结晶处理后，凯氏定氮法测得含量为99.5%)，维生素 片(浙南药业有限公司)，盐酸及其它试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2 1方法取维生素 对照品，用0.02mol/L盐酸溶液制成浓度约为1ml的溶液，以0.02mol/L盐酸溶液为空白，在
200～30Onm的波长范围内扫描，在262±1nm的波长处有最大吸收，与标准规定一致。另取维生素B4片处方量的各辅料适量.用0.02mol/L盐酸溶液制成空白对照溶液，在200～300nm的波长范围内扫描，结果表明辅料仅在末尾段有少量吸收，而在262nm附近没有吸收，散将262±1nm波长作为测定波长。
2.2 线性关系 精密称取维生素B4对照品约20mg，置lOOml容量瓶中，加0.02mol/L盐酸溶液使维生素B4溶解，并加至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液1、2、3、4、5ml，分别置50Inl量瓶中.加0.02mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，以0.02mol/L盐酸溶液为空白，求得回归方程为：Y=l7.470 A一0.1845.r=0.9999。结果表明维生素B4浓度4—20μg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系。
2.3 回收率试验 精密称取105℃干燥恒重的维生素 对照品约5Omg共5份，置100mL量瓶中，分别加人处方量的各辅料.制成模拟维生索B4片，加0.02mol/L盐酸溶液适量，振摇使维生索 溶解，加0.02mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置lOOml量瓶中，加O.02mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，在262±1nm的波长测定吸收度(A).根据回归方程求出浓度并计算回收率。
2.4 稳定性试验取上述测定溶液，在室温避光情况下放置4h.每隔1h测定1次，吸收度基本不变。
2.5 样品的测定取维生素B4片20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素B4 20mg)，置100ml量瓶中，同时精密称取经l05℃干燥至恒重的维生素B4对照品约50mg，置lOOml量瓶中，分别加0.02mol/L盐酸溶液使溶解，照回收率试验项下的方法测定吸收度(A)，根据两者的比值计算出相当于维生素既标示量的百分含量。同时与凯氏定氮法测得的结果比较。
2.6 重复牲试验取同一批样品，按“样品测定”项下取样5份，进行测定。结果平均含量为94.3% ，RSD=0.20% (n=5)。
3 小结
从以上结果可知，用紫外分光光度法测定维生素凰片的含量，与用凯氏定氯法测得的结果基本一致，但与费时费事的凯氏定氮法比较，紫外分光光度法具有仪器要求简单、操作简便、快速的优点，可以推广使用。