蛋白质组学技术筛选与鉴定鲤鱼嗅脑急性创伤后的应激蛋白质

《分析化学》2008年04期 
 
  蛋白质组学技术筛选与鉴定鲤鱼嗅脑急性创伤后的应激蛋白质
  包晓东;黄琳;黄河清;蔡宗苇
  　　优化建立鲤鱼(cyprinus carpio,CC)嗅觉端脑(嗅脑)全蛋白提取技术。联用低渗透裂解和液氮冻溶法破碎鲤鱼嗅脑组织(rhinencephalon tissue of cyprinus carpio,CCRT)、低速离心提取CCRT全蛋白,并采用双向凝胶电泳(2D-PAGE)技术进行有效分离。经分析与统计,每张CCRT的2D-PAGE图谱中的蛋白质斑点数目约为1200个。分别分离CCRT的脂溶性和水溶性全蛋白,并获得高分辨率的2D-PAGE图谱。选用差异蛋白质组学技术筛选经10%冰醋酸创伤后的CC,其端脑组织所表达出的6种应激蛋白质,并用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprinting,PMF)和数据库检索技术给予鉴定。其中3种蛋白质为70S热休克蛋白、β微管蛋白和DNA链接酶IV,有望作为研究大脑急性创伤后的应激修复途径和机理的指示蛋白质。
【作者单位】：厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室;厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室;厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室;香港浸会大学化学系 厦门361005厦门大学化学化工学院固体表面物理化学国家重点实验室;厦门361005;厦门361005厦门大学化学化工学院固体表面物理化学国家重点实验室;厦门361005;厦门361005厦门大学化学化工学院固体表面物理化学国家重点实验室;厦门361005厦门大学化学生物学福建省重点实验室;厦门361005;香港
【关键词】：鲤鱼嗅脑;蛋白质组学;创伤;应激蛋白质;优化提取与分离
【基金】：国家自然科学基金(No.40776060);厦门大学预研基金(No.xdkicx20051009)资助项目
【分类号】：Q51
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-04-005
【正文快照】：
　　1引言嗅觉神经通路是一个较为特殊的感觉通路,从感觉神经元到中枢神经期间的联系不经过血脑屏障,使得外源物质有可能通过这条通路快速到达脑部。利用嗅觉神经通路实现向中枢神经快速供药是目前神经药物科学发展的热点与难题之一。蛋白质组学已经逐渐演变成研究大脑中枢神经系统