《
分析化学》2008年04期
酶联免疫法测定人碱性成纤维
细胞生长因子
脂质体的
包封率 黄亚东;张宏波;赵文;苏志坚;曲红艳;项琪;张卉
建立了一种灵敏的定量
检测人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)脂质体中hbFGF含量的酶联免疫(ELISA)方法,应用于测定hbFGF脂质体的包封率。通过用hbFGF标准品溶液包被酶标板,加入特异性的鼠抗人hbFGF抗体(一抗)和山羊抗鼠IgG(二抗),采用多因素棋盘滴定方法确定最佳实验条件为:一抗浓度200μg/L,二抗浓度50μg/L。本方法的检出限为0.86μg/L,工作浓度范围1.0~10μg/L,批内RSD为3.95%~4.27%,批间RSD为4.19%~7.21%,不同操作者批内和批间的RSD分别为6.21%和9.12%,可重复性良好。本方法测定hbFGF脂质体超滤液和氯仿提取液中hbFGF含量分别为(3.325±0.193)μg/L和(18.454±1.063)μg/L,组内RSD分别为4.69%和4.52%。hbFGF脂质体包封率为82.06%。本方法特异性高、重复性好、快速、简便,可用于hbFGF脂质体包封率及其它含hbFGF制剂的含量测定。
【作者单位】：暨南大学医药
生物技术研究开发中心 广州510632(黄亚东;赵文;项琪;张卉);深圳致君制药有限公司 深圳518029(张宏波;苏志坚);南海朗肽制药有限公司 佛山528222(曲红艳)
【关键词】：酶联免疫法;人碱性成纤维细胞生长因子;脂质体;包封率
【基金】：国家
自然科学基金(No.30670541);广东省科技攻关项目(No.2004B10401019);广东省科技攻关计划项目(No.2004A10902006)资助
【分类号】：R94
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-04-031
【正文快照】：
1引言人碱性成纤维细胞生长因子(human basic fibroblast growth factor,hbFGF)是一个由146个氨基酸组成的阳离子多肽(分子量16~18kD,等电点为9.6),广泛分布在体内各组织器官中。hbFGF是一种很强的丝裂原,具有促进各种软组织损伤修复、加速肌肉及毛细血管的生长分化和神经组织