《
色谱》2008年03期
活性蓝F3GA固载的无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯
亲和色谱填料的制备与应用
卜春苗;王有贤;龚波林;阎超
以3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质,与三嗪染料活性蓝F3GA(Cibacron Blue F3GA)反应,制备出一种固定化染料聚合物高效亲和色谱填料。考察了应用该填料时流动相中的盐离子浓度、有机溶剂及流速等对牛血清白
蛋白(BSA)和溶菌酶(Lys)保留行为的影响。实验结果表明,该染料亲和填料具有良好的色谱性能。利用前沿色谱法
测定了染料与溶菌酶之间的表观解离常数为5.26×10-5mol/L。使用该填料成功地从鸡蛋清和小牛血清中分别分离纯化了Lys和BSA,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
分析显示Lys和BSA的纯度分别为95%和92%。
【作者单位】：宁夏大学
能源化工
重点实验室;宁夏大学能源化工重点实验室;宁夏大学能源化工重点实验室;上海通微分析技术有限公司 宁夏银川750021;宁夏银川750021;宁夏银川750021;上海通微分析技术有限公司;上海201203;上海201203
【关键词】：无孔单分散亲水性树脂;染料亲和色谱;固定相;蛋白质;纯度
【基金】：
科技部国际科技合作重点项目(2006DFA33690);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-04-0986);中国博士后科研基金资助项目(20060400976)
【分类号】：O657.7
【DOI】：CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-03-029
【正文快照】：
亲和色谱具有高选择性,可从复杂
生物体系中高效、快速地分离出相应的目标产品,在
生命科学和生物工程产品分离纯化及分析过程中有广阔的应用前景[1]。目前亲和色谱多以Sepharose和Dextran等软胶作基质,但这些介质存在着受压变形的缺陷,限制了其在实际应用中的快速纯化和生产效[2