《
色谱》2008年02期
基于强阳
离子交换色谱分离的
磷酸化肽段
富集策略
隋少卉;王京兰;卢庄;蔡耘;张养军;蔚文峰;钱小红
为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以
标准磷酸化
蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(SCX)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用。实验结果表明优化后的体系能够在30min内分离出磷酸肽段,而且非磷酸化肽段的干扰很少,这样便相对提高了磷酸化肽段在
质谱仪中的响应强度,重要的是该体系可以对复杂样品进行很好的分离。这说明SCX用于规模化磷酸化肽段富集的策略是可行的。本研究为磷酸化蛋白质组学规模化
分析提供了实用技术。
【作者单位】：蛋白质组学国家
重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学
科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所;蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所 北京102206防化指挥工程学院;北京102205;北京102206;北京102206;北京102206;北京102206;北京102206;北京102206
【关键词】：磷酸化;位点;强阳离子交换色谱;富集;蛋白质组学
【基金】：国家
自然科学基金资助项目(Nos.20405017,20505018,20505019,20635010);国家重点基础研究发展计划(“973”)项目(2004CB518707,2006CB910801,2006CB910803,2007CB714104)
【分类号】：Q51
【DOI】：CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-02-017
【正文快照】：
蛋白质的磷酸化修饰在生命活动中具有重要的调控作用,因此也是目前翻译后修饰蛋白质组研究中的热点[1]。但大规模分析磷酸化蛋白质在技术上还很具有挑战性,主要的技术挑战是分析灵敏度。由于
生物体内磷酸化蛋白质的含量少、
化学计量值低[2,3],因此
细胞内多数蛋白质中仅有少部分