高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸

《色谱》2008年01期    
 
  高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸
  罗昔波;唐爱国;皮兰敢;肖乐东;敖翔;卜艳红;王瑞
  　　建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱(300mm×6.0mm,10μm),流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365nm和480nm。血清标本经5%(v/v)高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定。研究结果表明Kyn保留时间约为8.3min,线性范围为0.098~19.6μmol/L,最低检出浓度为0.04μmol/L,回收率为90.8%~96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰。建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用。
【作者单位】：中南大学湘雅二医院检验科 湖南长沙410011
【关键词】：高效液相色谱法;荧光检测;犬尿氨酸;人血清
【基金】：湖南省医药卫生科研计划课题(C2005019);湖南省科技计划项目课题(05SK3026)资助
【分类号】：R446.1
【DOI】：CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-01-011
【正文快照】：
　　犬尿氨酸(kynuren ine,Kyn)是人体必需氨基酸色氨酸(tryp tophan,Trp)的重要代谢产物之一[1]。哺乳动物摄入体内的Trp绝大多数经犬尿氨酸原途径代谢,即Trp在色氨酸-2,3双加氧酶(L-tryp tophan-2,3-d ioxygenase,TDO)或吲哚胺-2,3-双加氧酶(indo leam ine2,3-d ioxygenase,IDO)