宠物食品中三聚腈胺和三聚腈酸的LC/MS/MS分析方法

背景

      最近爆出从中国进口的宠物食品中含有违法禁用的添加剂—三聚氰胺和三聚氰酸，并且造成宠物死亡。目前大量来自中国的此类宠物食品已要

求召回，现在产生此类宠物食品的企业和相关的检测机构急需检测此类食品的快速灵敏的检测技术以确保此类宠物食品的安全可靠性。

     本报告建立了用LC/MS/MS快速高灵敏地检测宠物食品中三聚氰胺和三聚氰酸的方法，样品经过简单的前处理后，就可进行分析，总分析时间为10分钟，三聚氰胺和三聚氰酸的定量限均为1ug/kg。本方法采用多反应监察（MRM）的离子比率来进行定性确证。

前处理方法

样品前处理方法采用液/液萃取（LLE）方法，步骤如下：

● 1 取5克样品匀桨后再加入5ml乙腈

● 2 充分振荡提取后，静置15-30分钟

● 3 再加入5mL 饱和氯化钠溶液，充分振荡混合，再静置15 ～ 30分钟

● 4 高速离心后，分离上清液

● 如果样品中含目标物浓度很高，则需用水/乙腈（50/50）进一步稀释

液相色谱条件

● 岛津20AD组成的二元高压液相色谱系统，CBM-20A控制器，半微量梯度混合器SUS-20A和SIL-20AC 自动进样器。

● 色谱柱：GL Science Inertsil HILIC 5um  3*150mm,柱温：40度

●  资生堂：CAPcell Pak         CR(1:4) 2.0*100mm 5um

● 流动相：A：含有10mM乙酸胺的乙腈，B：含有10mM乙酸胺的水

● 流速：5ml/min，进样量：5ul，

● 流动相梯度表

 质谱条件

● 美国应用生物系统公司的API3200 串联四极杆液质联用仪，
电离方式：三聚氰胺ESI+，三聚氰酸辣ESI-，
检测方式：MRM

MRM和离子源参数

两种化合物的TIC和定量曲线(0.5ppb—500ppb)

浓度为1 ppb的两种化合物的信噪比

结论

● 三聚氰胺和三聚氰酸用正相色谱进行分离，其色谱柱是亲水键合的色谱柱。质谱检测的电离模式是三聚氰胺用ESI+ ，三聚氰酸用ESI-，本方法重现性是在每个浓度点都重复五次进样(RSD%<2)，线性范围达到三个数量级（0.5ppb—500ppb），两种化合物的检测限（LOD）均为1ug/kg。

● 此方法已加入“可立快”技术平台