八肽胆囊收缩素对小鼠神经元蛋白质磷酸化的影响

摘要　目的:从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度,对小鼠神经元在八肽胆囊收缩素(CCK8 )刺激下的信号转导通路进行初步研究。方法:将培养的小鼠神经元分为对照组(加入无磷培养基) 、实验组(加入CCK8 ) 、拮抗剂组(分别加入CCKA 受体拮抗剂L2364 718(或) CCKB 受体拮抗剂L2365 260) 。采用双向电泳法观察CCK8 和受体拮抗剂作用下蛋白质磷酸化水平的改变。结果: CCK8 作用不同时间后,神经元蛋白质磷酸状态发生明显改变,涉及的信号转导相关磷酸化蛋白质包括多种蛋白激酶、胞内信号分子、激素受体、转录因子等;动力学分析结果显示,主要的信号转导相关蛋白的磷酸化时间动力学曲线多数呈峰型;应用CCK受体拮抗剂作用后的结果表明,在皮质神经元中同时存在CCK的2种类型受体,其中B型受体介导的信号转导途径更复杂。结论: CCKA型、B型受体均可介导CCK8 在神经元的信号转导,其中B型受体介导的信号途径可能包括肌醇磷脂信使系统、cAMP2PKA途径、MAPK途径和JNK途径等。