耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件

摘　要: 利用PCR 扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001 染色体DNA 为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoR Ⅰ酶切的温控表达载体pBV220 连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109 ,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后对该工程菌在LB 培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明:在LB 培养基中,诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5 h ,最大产酶量达到72. 9 U/ mL ;在半合成培养基中,于30 ℃培养4 h ,再于42 ℃诱导培养6 h ,产酶量最高达到131 U/ mL 。