大米中杀虫环残留量测定方法

　　1 主题内容与适用范围

　　本标准规定了用气相色谱法测定大米中杀虫环的含量。

　　本标准适用于大米中杀虫环的残留量测定。

　　本方法最低检出限为4.7×10-9g。

　　2 原理

　　大米样品在酸性条件下，杀虫环经甲醇提取后，通过液-液分配纯化后再转溶至甲醇中，用备有电子捕获检测器的气相色谱仪测定，与标准比较定量。

　　3 试剂

　　所用试剂为分析纯试剂。

　　3.1 盐酸：5mol/L。

　　3.2 无水硫酸钠：用前于105℃烘2h，备用。

　　3.3 助滤剂：celite 545。

　　3.4 甲醇：在本色谱条件下应无杂质峰，否则应重蒸馏至合格。

　　3.5 二氯甲烷：取一定量的二氯甲烷，用其体积一半的水振摇洗涤5或6次(最后一次必须待分层清楚后，放出二氯甲烷层，应避免将水带入，以免加浓酸时爆沸产生危险!)，再用其5%体积的浓硫酸振摇洗涤，直至硫酸不变色。然后用5%氢氧化钠溶液洗涤至中性，蒸馏水洗2或3次，再经无水硫酸钠脱水干燥，通过全玻璃装置重蒸馏，取其39～41℃馏分，经检验不含杂质峰。

　　3.6 1%草酸甲醇溶液。

　　3.7 固定相：5% OV-225 Chromosorb W(AW-DMCS)。

　　3.8 杀虫环标准溶液：用甲醇将杀虫环标准品配制成2.0?g/mL的工作液。

　　4 仪器

　　4.1 气相色谱仪(具备63Ni放射源的电子捕获检测器)。

　　4.2 稻谷出糙机。

　　4.3 小型电动粉碎机。

　　4.4 旋转式蒸发浓缩器。

　　4.5 往复式电动振荡器。

　　4.6 60mL分液漏斗若干。

　　5 分析步骤

　　5.1 提取：将大米粉碎40目过筛，称取40g，放入250mL具塞三角烧瓶中，加甲醇100mL和5mol/L盐酸1.0mL，于振荡器上激烈振荡1h后，通过盛有少量celite545的滤纸过滤。收集50mL滤液转入250mL圆底烧瓶中，用旋转蒸发器于50℃水浴中浓缩至2～3mL左右。

　　5.2 纯化：将残留液转至60mL分液漏斗中，分别用蒸馏水和二氯甲烷20mL分两次洗涤烧瓶，每次洗液合并到分液漏斗中，然后用pH试纸检查水层pH值应为1左右。

　　振摇分液漏斗30s静置分层后，弃去下部二氯甲烷层，再用20mL二氯甲烷振摇洗涤3～4次，弃去二氯甲烷层。向分液漏斗中慢慢加入少量粉末碳酸氢钠至 pH7～8。用30mL二氯甲烷轻轻振摇提取水层共3次，每次将二氯甲烷提取液通过盛有无水硫酸钠的漏斗滤入250mL圆底烧瓶中，加0.2mL 1%草酸-甲醇溶液和5mL甲醇，用旋转蒸发器于30℃水浴中浓缩至1.0mL左右，残留液转入具塞刻度试管中，视含量高低用甲醇定容至5～10mL。取 1.0?L进入色谱仪，外标法定量。

　　5.3 气相色谱条件

　　5.3.1 色谱柱：?2mm×2m玻璃柱;

　　填装涂有5% OV-225Chromosorb W(AW-DMCS)的固定相。

　　5.3.2 温度

　　柱温：180℃;

　　汽化室温：200℃;

　　检测室温：240℃。

　　5.3.3 气体速度：载气(氮气)流速30mL/min。

　　5.3.4 其他条件

　　仪器灵敏度：10;

　　衰减：16;

　　纸速：0.4cm/min;

　　氮气：高纯氮。

　　5.4 测定

　　按上述色谱条件调试仪器，待稳定后用微量注射器注入样品或标准液，以保留时间为定性指标。

　　将杀虫环的标准液用甲醇稀释成0.4、0.8、1.2、1.6、2.0?g/mL的系列工作液，分别注入色谱仪1.0?L，测量峰高。以杀虫环量为横坐标，峰高为纵坐标绘制工作曲线，根据样品的峰商定量。

　　6 计算

　　

　　式中：X——样品中杀虫环含量，mg/kg;

　　B——测得样品的峰高值，查标准曲线后得到的杀虫环量，ng;

　　V——定容体积，mL;

　　A——进样量，?L;

　　m——样品质量，g;

　　2——测定值相当于样品量一半，计算全量应乘以2。

　　7 精密度和灵敏度

　　7.1 精密度

　　大米样品添加回收实验结果的变异系数小于10%。

　　7.2 灵敏度：0.001mg/kg。

　　8 其他

　　大米中杀虫环及标准品杀虫环色谱图如下：