聚丙烯酰胺凝胶管制备与检测

　　内容摘要：用微量注射器取待检液50L，注入凝胶管上，成叠加层，每支玻管通入3 mA电流电泳，直至亚甲蓝的+蓝色谱带达到距凝胶管下端7 mm处，停止电泳，从玻管中拨出凝胶于染色液中过夜，用7%醋酸脱去电泳谱带以外的颜色。按照肉、大豆、小麦圆盘电泳谱带比较即可判定。

　　取尿素13.4 g，加TEME[)缓冲液(pH3.5)3.5 mI。丙烯酰胺液7 mL、水4.5 mI，充分混合溶解，如有气泡经减压脱气后，加聚合促进剂1.4 mL，使总量为28 mL，立即用注射器移入长100 InIn、内径5 mm玻管中，玻管上端空出约10 mm，静置凝胶化，加水封存。

　　检测称取样品(10 g)于乳钵中、充分磨碎。准确称取磨碎样品O.100 g于离心管中，加10 mol尿素2%巯基乙醇液lO mL，混匀，24 h后，离心，上清液待检。将聚丙烯酰胺凝胶管，去除封存水装进缓冲液槽中，下部电极接在阴极上，上部电极接在阳极上，在上、下槽中注入稀释10倍电泳缓冲液(pH4.O)，上部缓冲液加指示剂2滴，搅拌。

　　用微量注射器取待检液50L，注入凝胶管上，成叠加层，每支玻管通入3 mA电流电泳，直至亚甲蓝的+蓝色谱带达到距凝胶管下端7 mm处，停止电泳，从玻管中拨出凝胶于染色液中过夜，用7%醋酸脱去电泳谱带以外的颜色。按照肉、大豆、小麦圆盘电泳谱带比较即可判定。