人肝癌裸鼠皮下成瘤的建立试验

裸鼠，又称为无胸腺裸鼠，目前已经成为医学生物学研究领域不可缺少的试验动物模型。在医学上，人类肝癌的基础研究和实验研究常常会采用裸鼠成瘤实验。美迪西药理学服务可以提供裸鼠成瘤、裸鼠皮下瘤实验服务等，来帮助客户进行医学上的研究。裸鼠成瘤实验，即在裸鼠皮下注入肿瘤细胞，观察肿瘤的形成、发展及抗肿瘤药物的效果。

目前肝癌基础和临床实验研究理想的动物模型是以人肝癌组织移植裸鼠建立的动物转移瘤模型，此模型最接近人类肝癌的整体实验模型。人肝癌组织裸鼠移植瘤模型是指把人肝癌组织块接种于裸鼠皮下建立的实验动物模型，常用于筛选抗肿瘤药物和制剂、实验性治疗和抗肿瘤机制研究

人肝癌裸鼠皮下成瘤的的实验原理：先用组织学完整的新鲜人肝癌组织接种于裸鼠皮下，形成皮下移植瘤，然后用此移植瘤组织再接种于裸鼠肝内，建立肝原位移植瘤模型（间接肝原位移植瘤模型），并将其与直接肝原位移植瘤模型、皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型作比较。

所需材料与工具：

所需的实验材料有NC裸鼠、BALB/C裸鼠；

试剂、试剂盒有肝癌外科手术切除、标本、Hanks液、戊巴比妥钠、甲醛、石蜡；

仪器、耗材有针头、光学显微镜、手术刀、剪刀、纱布、消毒液、口罩。

一、实验步骤    

1、间接肝原位移植瘤模型的制备

（1）用新鲜的肝癌外科手术切除标本，在Hanks液中，去除坏死组织和非癌组织后切成1～2 mm3小块；

（2）取2块瘤组织，在离体40 min内用粗针头植入裸鼠腰背部皮下，待皮下移植瘤长到直径约1 cm时切取肿瘤，在Hanks液中，去除坏死组织后切成1～2 mm3小块，裸鼠用戊巴比妥钠腹腔麻醉后，行左上腹横切口，暴露肝脏；

（3）取上述2块瘤组织，在离体40 min内用粗针头植入裸鼠肝右叶深部实质内，全层关腹。

2、直接肝原位移植瘤模型的制备

（1）同一例新鲜肝癌手术切除标本，处理方法同皮下移植，裸鼠处理同间接肝原位移植，取2块瘤组织，在离体40 min内用粗针头直接植入裸鼠肝右叶深部实质内；

（2）皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型的制备。

二、病理检查和相关指标检测

1、解剖和组织学检查

（1）所有裸鼠接种后，分组分笼饲养，自由进食，每天观察1～2次；

（2）当裸鼠处于全身衰竭状态时处死并作大体解剖，对接种瘤和转移瘤分别进行观察、测量，记录肿瘤侵袭和转移情况，重要器官（主要为肝和肺）经10%中性甲醛固定后，常规石蜡制片，光学显微镜检查。

2、周围血甲胎蛋白(AFP)检测；

处死前，均采用摘眼球采血的方法获得血液，用生化法检测AFP的分泌量。

3、瘤细胞DNA含量分析

留取部分移植瘤标本采用流式细胞术进行DNA含量分析。

人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型适用于抗肿瘤药物的筛选和药物的抗癌效果评价等，美迪西可以根据客户的需求提供动物模型，用来检测药物的有效性