生物药物研发之单克隆抗体

目前，单抗克隆药物、蛋白药物、基因与核酸药物等是我国生物药物研发的重点，其中单克隆抗体药物作为一种具有独特优势的生物靶向药物，具有特异性高、靶向性强和毒副作用低的特点，在治疗疾病方面效果显著。

单克隆抗体是由由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，伴随着抗体技术的不断发展以及新型抗体的不断出现，单克隆抗体药物已成为制药业发展最快的领域之一。一些研究表明，在生物药物研发领域，目前正在研究的生物技术药物中有四分之一都是单克隆抗体药物，期间又涌现出了各种单抗衍生物，包括抗体药物偶联物、小分子抗体、双特异性抗体等。美迪西是一家综合性的生物医药研发服务公司，在上海建立了一家集化合物合成、化合物活性筛选、结构生物学、药效学评价、药代动力学评价、毒理学评价、制剂研究和新药注册为一体的符合国际标准的综合技术服务平台。

1、单克隆抗体的制备

传统的单克隆抗体的制备通常是采用杂交瘤技术，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原表位的特性性抗体，即单克隆抗体。

杂交瘤技术使鼠源单克隆抗体被广泛用于人类疾病的诊断和研究,建立了治疗性抗体的第一个里程碑。随着生物学技术的发展和抗体基因结构的阐明,应用DNA重组技术和抗体库技术对鼠单抗进行人源化改造,先后出现了嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体,它们从不同角度克服了鼠单抗临床应用的不足,使抗体制备技术进入了一个全新的时代。

通过基因工程改造，使单抗和人体内的抗体分子具有尽可能相似的特性，抗体人源化。从鼠源到全人源，单抗在患者体内人抗鼠免疫反应发生概率逐步降低，治疗效果和安全性逐步提高，因此全人源单抗是单抗发展的趋势。但是，随着人源化程度的提升，单抗制品的亲和力会逐渐下降。因此，在保证消除人抗鼠反应的前提下提升单抗制品的亲和力，是单抗药物开发的核心技术壁垒。

2、单克隆抗体的研发趋势

噬菌体展示技术已经成为人源单抗筛选主流。随着单抗人源化进程的不断深入，以噬菌体展示技术（用PCR技术从人免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，克隆到噬菌体载体上并以融合蛋白的形式表达在其外壳表面）为核心的大规模单抗筛选平台日益受到重视。该技术不仅可以获得全人单抗，而且不需要细胞融合，试验周期短，过程简单，是人源抗体制备技术的重大突破，目前国际主流单抗生产企业均采用噬菌体展示技术筛选单抗。

2、表达培养技术是单抗产量形成和质量控制的关键，表达方法、反应器规模、表达体系和表达量是判断企业技术水平高低的重要指标。

3、分离纯化技术是单抗生产的最后一道关键环节，工业上一般采用硫酸铵沉淀、离子交换层析、蛋白-Sepharose亲和层析等方式纯化单抗，由于平均每增加一个纯化步骤产品得率将会降低13%，因而在保证纯度的同时尽可能提高得率也是考验企业生产水平的重要环节。

目前，单克隆抗体药物的研究工作大部分集中在针对与哮喘、白血病、非小细胞肺癌和多发性硬化相关的已知分子靶点的改进抗体的开发。在不久的将来，下一代具有改善性能的抗体（包括ADC和bsAb）作为Biobetter抗体治疗，预期将受到欢迎。