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研究表明 TCF21能抑制肺癌细胞的裸鼠成瘤能力
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下一篇 2018-07-19 14:25:34
转录因子21是一种抑癌基因,在多种肿瘤中具有抑癌功能,抑癌基因的失活会导致肿瘤的形成和恶性转化。目前有许多研究表明,抑癌基因的失活在肺癌的发生发展中扮演着重要角色。肺癌是临床常见的恶性肿瘤,有着较高的癌症相关死亡率。有研究者在肺癌的裸鼠成瘤实验中发现,促进肺癌细胞中的TCF21表达后,肺癌细胞的生长受到抑制,凋亡增多。
肺癌是发生于支气管粘膜上皮的呼吸道恶性肿瘤,近年来肺癌的发病率显著增高,肺癌发病率在男性恶性肿瘤中已居首位,在女性中发病率也显著增高,占女性常见恶性肿瘤的第2位或第3位。肺癌已成为危害人民生命健康的一种主要疾病,其早期多无症状,几乎2/3的肺癌患者在就诊时已是晚期(Ⅲ期或Ⅳ期)。原发瘤、转移瘤、全身症状或肿瘤伴随症状均可是病人的首诊症状。
TCF21基因位于6号染色体的6q32-34,是碱性螺旋-环-螺旋家族的成员之一,其在肺组织、肠道组织、肾组织、性腺等组织中均有表达。研究表明,TCF21与肿瘤的发生有关,在乳腺癌、淋巴癌、结直肠癌、卵巢癌等组织中均发现TCF21基因表达异常下调或确实。
为探讨转录因子(TCF)21对肺癌细胞裸鼠成瘤的影响,选取人肺癌细胞SPC-A1,细胞转染TCF21过表达载体(过表达组)和空载体(空载体组),设置对照组,对照组中只加入转染试剂,培养48 h,Western印迹检测细胞中TCF21的表达水平。
裸鼠又称无胸腺裸鼠,肺癌裸鼠模型的建立有助于改进诊断模式及探索新的治疗药物。美迪西提供裸鼠成瘤、裸鼠皮下成瘤等试验服务,可以根据客户的需求提供各种有效的动物模型,用来检测药物的有效性。实验动物有非人类灵长动物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、裸鼠等各种种类。
将过表达TCF21的肺癌细胞接种到裸鼠皮下,分别在5、10、15、20 d测量肿瘤的长径和短径,计算肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线。在20 d时,取出肿瘤,称量肿瘤重量,并计算瘤重抑瘤率,同时Western印迹检测肿瘤组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、TCF21表达水平。
结果:
发现过表达组肺癌细胞中TCF21水平明显高于对照组(P<0.01)。过表达组肿瘤生长与对照组相比明显受到抑制(P<0.01)。空载体组和过表达组的抑瘤率分别为(7.52±0.07)%和(72.24±0.61)%,且过表达组肿瘤重量明显低于对照组(P<0.01)。过表达组肿瘤组织中Cleaved Caspase-3、TCF21表达水平明显高于对照组,而Bcl-2水平明显低于对照组(均P<0.01)。
结论:
在裸鼠成瘤实验中,TCF21能够抑制肺癌细胞的裸鼠成瘤能力。
还有研究者发现抑癌基因TCF21可抑制肺癌细胞A549的增殖和迁移、及诱导凋亡。研究者利用慢病毒转染技术在肺癌A549细胞中高表达TCF21基因,以荧光定量PCR、Western blot分析目的基因的表达,并采用Transwell、MTT法、流式细胞术检测TCF21高表达对A549迁移、增殖、凋亡的影响。结果成功在肺癌细胞株A549中高表达TCF21,且高表达TCF21后A549的细胞生长和迁移能力受抑制、凋亡率增高。
上述两个实验表明,TCF21能够在体内抑制肿瘤的生长,能够抑制肺癌细胞裸鼠成瘤,这与TCF促进肺肺癌细胞A549凋亡有关。
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