沉默Med19基因与人乳腺癌的关系研究

研究表明一部分乳腺癌是遗传所致，还有一部分是由与此疾病相关的基因决定的，在裸鼠成瘤实验中，研究人员发现一些基因被沉默之后，乳腺癌细胞不再生长。裸鼠又称无胸腺裸鼠，由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情况下，不排斥来自异种动物的组织移植，因此可用其建立理想的人类肿瘤可移植实验动物肿瘤模型，一些肿瘤模型公司可为客户提供裸鼠来进行实验研究。

医学上通常用裸鼠成瘤实验来研究肿瘤及其治疗，用带有人源移植瘤的裸鼠来试探可能的靶向药物,可以在肿瘤复发之前都找到真正有效的靶向药物。美迪西可根据客户的需求提供各种有效的动物模型,用来检测药物的有效性，实验动物有非人类灵长动物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、裸鼠等各种种类。

Med19是中介体其中的一个亚单位，又称为肺癌转移相关蛋白，最初由高转移肺癌中克隆得到已被证实参与细胞信号由胞外向胞内转导。中介体最早发现于酵母菌中，是由多个蛋白质亚基组成的生物大分子复合物，属于RNA聚合酶Ⅱ通用转录装置的基本组分，在真核生物mRNA合成的活化和抑制中发挥关键作用，对RNA聚合酶Ⅱ活力进行调节。研究发现抑制Med19基因可引起某些调节细胞生长、细胞分化和凋亡的基因的表达发生改变，提示Med19可能参与细胞周期调控、信号转导或转录调控。

乳腺癌不属于妇科癌症，但它是女性肿瘤中发病率最高的一种，已超过子宫颈癌的发病率。调查显示，我国每年有4万人死于乳腺癌，成为城市女性的“第一杀手”。最新透露的数字表明：我国女性乳腺癌发病率与五年前比上升了三倍多，其中发病率最高的是北上广深等经济发达的大城市，生活水平的高低与发病率的高低成正比。家族遗传因素是乳腺癌患者患病的主要原因之一，比如母亲、姐妹等家庭成员中有患乳腺癌的人，其发病几率比其他人高出四倍。

乳腺癌的发生还与人体内的基因有关。近年来，随着基因组技术的发展，与乳腺癌相关的基因分子逐步被揭晓，关于乳腺癌基因突变的研究也相继报道在各大国际顶级期刊上。MCF7是一种病变的细胞，也是人乳腺癌细胞。该细胞是从一名69岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离建立的。该细胞保留了多个分化乳腺上皮的特性，包括：能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成隆突结构（domes）；该细胞表达WNT7B癌基因；TNF-α可以抑制MCF-7细胞的生长；抗雌激素处理能调节细胞胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）的分泌。

通过观察慢病毒介导的siRNA沉默Med19基因对人乳腺癌裸鼠成瘤的影响,探讨Med19在乳腺癌发生发展中的作用。利用前期已稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞,采用Westernblotting方法检测Med19蛋白的沉默效果。稳定感染Med19-siRNA慢病毒载体的人乳腺癌MCF-7细胞接种于BALB/c裸鼠背侧皮下,观察裸鼠成瘤情况和移植瘤生长情况,并绘制生长曲线。以慢病毒空载体感染组作为阴性对照组。

结果发现所构建的Med19-siRNA慢病毒载体能有效抑制MCF-7细胞Med19蛋白的表达,蛋白表达水平下降了62%,Med19基因沉默组较空载体慢病毒感染组瘤体生长速度慢(t值分别为4.843、6.291、5.317,均P<0.01),肿瘤终体积分别为(620.08±263.07)mm3和(1406.77±351.14)mm3,终重量分别为(0.20±0.18)g和(0.67±0.27)g,差异有统计学意义(t值分别为4.399、3.615,均P<0.01)。

最终得出结论:Med19基因沉默能有效抑制人乳腺癌裸鼠成瘤和移植瘤生长,表明Med19在乳腺癌发生发展中起到重要作用，并有可能成为乳腺癌靶向治疗的潜在靶点。 

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，在中国乳腺癌的发生率呈不断上升趋势，严重威胁妇女的生命。尽管乳腺癌的发病机理还不清楚，但是普遍认为癌基因和抑癌基因的改变可能与其发生发展有关，进行Med19基因对人乳腺癌裸鼠成瘤实验的影响，为研发治疗乳腺癌疾病的方法提供了理论依据。