如何提取纯化白细胞中的RNA?试剂盒来啦~

上一篇 / 下一篇  2019-01-25 17:23:27/ 个人分类:试剂盒


白细胞(Leukocyte,也称为White blood cell,缩写为WBC)是免疫系统的细胞,其参与保护机体免受传染病和外来入侵者的侵害。白细胞由造血干细胞产生和衍生,遍布全身,包括血液和淋巴系统。白细胞有细胞核,可以与其他血细胞,无核红细胞(RBC)和血小板区别开来。白细胞可分为五种主要类型:中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,淋巴细胞和单核细胞。

白细胞是人体与疾病斗争的"卫士"。当病菌侵入人体体内时,白细胞能通过变形而穿过毛细血管壁,集中到病菌入侵部位,将病菌包围、吞噬。在血液中白细胞的数目往往是一个健康与否的指标,因此,白细胞计数是一个重要血常规检查的项目。白细胞数量增加超过上限称为白细胞增多症,常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。白细胞数量降低低于下限称为白细胞减少症,常见于病毒感染、免疫系统衰弱、放化疗的影响。 

如何提取纯化白细胞中的RNA?艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐Norgen Biotek品牌的白细胞RNA提取纯化试剂盒。 

产品名称及描述

货号

上样量

平均产量(500μL人血)

产品说明

Leukocyte RNA Purification Kit

21200

10μL-2mL

1.5 μg

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Leukocyte RNA Purification Plus Kit

21250

≤3mL

1.5 μg

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Leukocyte RNA Purification 96-Well Kit

37800

10μL-1mL

1.5 μg

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白细胞RNA提取纯化试剂盒的特点和优势: 

用提供的RBC裂解缓冲液在几分钟内分离来自全血的白细胞;

分离总RNA,包括microRNA,不含苯酚或氯仿;

处理多达3 mL的血液并将白细胞RNA浓缩至10至20μL;

操作快速方便;

纯化的RNA可用于任何下游应用,包括RT-PCR,qRT-PCR,NGS,微阵列等。

【白细胞RNA提取纯化试剂盒(货号21200和21250)-各品牌横向对比】

通过毛细管凝胶电泳证明Norgen的白细胞RNA纯化试剂盒分离的RNA的质量。从200μL仓鼠血液中分离总RNA,并在Agilent Lab-On-A-Chip上分离RNA时,可以观察到所有RNA种类,包括microRNA,18S rRNA和28S rRNA。相比之下,竞争对手的试剂盒未能纯化小RNA种类。更重要的是,Norgen的试剂盒产生的RNA样品的产量和纯度高于竞争对手试剂盒。

PS:通过对比Norgen样品,可以看出竞争对手样品中两个主要rRNA条带之间缺少额外峰。相反,由于RNA降解,竞争对手样品在rRNA条带之间具有额外的峰。

为了评估纯化的RNA的生物活性,Norgen厂家进行了RT-qPCR测试。使用Norgen的白细胞RNA提取纯化试剂盒和竞争对手的试剂盒对比,从200μL的仓鼠血液中分离总RNA。然后将纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,用于检测β-actin基因或miR-21。可以看出Norgen试剂盒分离的小RNA成功扩增miR-21转录物。但竞争对手的试剂盒未能纯化microRNA,这可以通过缺乏扩增来证明。 Norgen的试剂盒不仅可以分离大RNA,还可以分离microRNA,表明分离的RNA种类的多样性。这进一步表明,所分离的所有RNA种类都具有高纯度并保留了其生物活性。(蓝色为Norgen的样品,红色为市场上领先的竞争对手样品)

白细胞RNA提取纯化试剂盒-96孔板(货号37800),厂家测试:

不使用苯酚提取的高质量白细胞RNA的一致性和产量分析。使用Norgen的96孔板试剂盒从200μL等份的仓鼠血液中分离总RNA,重复12次。 取5μL分离的RNA在1.2%甲醛琼脂糖凝胶上分离(A),将1μL分离的RNA使用RNA 芯片分离并观察(图B),均显示高产量和高质量。 此外,所有样品均显示包括小RNA在内的所有大小RNA的有效回收(箭头)。

白细胞RNA提取纯化试剂盒精彩文章鉴赏:

 MicroRNA molecular profiling from matched tumor and bio-fluids in bladder cancer.Molecular Cancer. 2015.

Novel Noncompetitive IL-1 Receptor-Biased Ligand Prevents Infection- and Inflammation-Induced Preterm Birth.Journal of Immunology. 2015.

Enhanced antioxidant capacity and anti-ageing biomarkers after diet micronutrient supplementation.Molecules. 2014.

Increased Il-4 Mrna expression and poly-aromatic hydrocarbon concentrations from children with asthma.BMC Pediatrics.2014

Targeted Inhibition of Serotonin Type 7 (5-HT7) Receptor Function Modulates Immune Responses and Reduces the Severity of Intestinal Inflammation.Journal of Immunology.2013

Norgen Biotek成立于1998年,公司总部位于加拿大,是一家著名全球化生物技术公司,生产基于专利技术的核酸和蛋白质纯化及富集产品用于研究和诊断。Norgen Biotek 在2003年获得加拿大国家研究委员会颁发的科技创新奖,是一家致力于样品制备并获得ISO 9001(产品质量)、ISO 13485(产品可用于商业化的医疗设备,包括用于体外诊断领域)和ISO 15189(可用于临床检测机分子诊断领域的研发能力)认证的生物科技公司。目前该公司的产品多达700余种,提供一流的样品制备试剂盒,应用于基因组和蛋白组等不同的领域。

艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等,可以在第一时间为用户提供最前沿的专业资讯、完备的产品及物流服务。

作为Norgen Biotek在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的Norgen Biotek产品以及订制服务。

 


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