一种可怕的人畜共患病——西尼罗病毒病

西尼罗是一种主要由鸟类携带，经蚊虫传播给人的病毒。人感染西尼罗病毒之后容易引起一种急性人畜共患病-西尼罗热疾病。有研究者利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统成功表达了西尼罗病毒囊E蛋白，为进行治疗西尼罗病毒的药物研发提供了研究基础。西尼罗病毒可以引起人和马的西尼罗病毒性脑炎，西尼罗热的流行曾给非洲、欧洲、中东、西亚及中亚、大洋洲以及北美的人们健康造成严重的损害和巨大威胁。虽然我国尚无西尼罗病毒感染的病例报道，但是从该病毒在其他国家的快速流行来看，开展西尼罗病毒的检测研究和药物研发非常有必要，同时也要防止西尼罗病毒的入境。

1、西尼罗病毒蛋白的表达

E蛋白是西尼罗病毒的主要抗原结构蛋白，能诱导机体产生中和抗体，它参与病毒与宿主细胞亲和、吸附以及细胞融合过程，是病毒亲嗜性以及毒理的主要决定蛋白，因此可以作为诊断和疫苗的靶分子。杆状病毒-昆虫细胞表达系统由转移载体、杆状病毒载体和宿主细胞组成，该系统采用一个或多个杆状病毒的超强启动子，将外源目的基因插入到启动子后，获得重组病毒，这种重组病毒在昆虫细胞复制的同时，使外源基因得到高效表达，是一种适用于毒性蛋白质及糖蛋白表达的分泌蛋白表达系统。美迪西生物医药提供重组蛋白表达服务，拥有多种蛋白表达系统，包括原核蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统（杆状病毒）和哺乳动物细胞蛋白表达系统，具备多种融合技术。

有研究者利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达西尼罗病毒囊膜（WNV-E）蛋白，并进行鉴定^[1]。该研究者利用分子克隆技术将WNV-E基因克隆至杆状病毒供体质粒pFastBac1中，构建重组供体质粒pFastBac-E，转化大肠埃希菌DH10Bac，构建重组穿梭质粒Bac-E，转染sf9细胞，收获含WNVE基因的重组杆状病毒AcMNPV-E，采用间接免疫荧光及Westernblot法检测E蛋白的表达。

结果重组供体质粒pFastBac-E经PCR及双酶切鉴定证明构建正确，重组穿梭质粒Bac-E经PCR鉴定证明构建正确，转染约96h后，sf9细胞体积变大、变圆，细胞颗粒化，进而从培养板上脱落，漂浮，收获的第1代AcMNPV-E经PCR鉴定为阳性。感染重组杆状病毒AcMNPV-E的sf9细胞周围出现绿色荧光，表达的目的蛋白可与兔抗WNVE蛋白多克隆抗体及鼠抗His单克隆抗体特异性结合，在相对分子质量约53000处可见目的蛋白条带。利用杆状病毒／昆虫细胞表达系统成功表达了WNVE蛋白，为WNV快速诊断方法及新型疫苗的建立奠定了基础。

2、西尼罗病毒导致的疾病

西尼罗病毒能够导致严重的人畜共患病，人感染西尼罗病毒，通常主要表现为西尼罗热、西尼罗病毒性脑炎^[2]；极少数病理还可表现为严重的胰腺炎、肝炎、心肌炎等。还有报道称西尼罗病毒能够导致类似脊髓灰质炎样的疾病，临床上称为脊髓灰质炎样综合症。多种动物如鸟类以及马牛等哺乳动物对西尼罗病毒敏感，可以导致脑炎、心肌炎、流产以及死亡等。人群感染西尼罗病毒，经外周血西尼罗病毒扩增繁殖，有一个短暂的病毒血症的过程，然后病毒侵入外周淋巴结以及中枢神经系统等靶器官，导致疾病。

3、西尼罗病毒的传染途径

西尼罗热的传染源主要包括处于病毒血症期的患者和超过150种野生鸟类。一些研究表明家畜、家禽，特别是马、猪、狗和松鼠也可感染此病毒，因此这些动物也是西尼罗热的传染源。

（1）蚊虫传播

西尼罗病毒主要经蚊虫叮咬传播，传播该病毒的蚊虫主要是亲鸟类蚊虫，包括吸人血蚊虫，从40多种库蚊、伊蚊和曼蚊以及一些种类的蜱中分离到病毒，库蚊是主要传播媒介。因此控制蚊虫和减少暴露是预防西尼罗病毒在任何动物中传播最有效的方法。

（2）人与人之间的传播

美国还发现西尼罗病毒可以通过器官移植、输血或使用血液制品在人与人之间传播，也可以由母乳喂养和经胎盘垂直传给婴儿，实验室感染西尼罗病毒也有报道。

4、西尼罗病毒的诊断

西尼罗病毒感染的诊断通常是结合临床表现、流行病学资料和特异的西尼罗病毒检测，对患者血清、脑脊液和鸟的脑组织进行病毒的分离培养可作为确诊方法之一。尽管在西尼罗热患者普遍存在病毒血症，但由于病毒血症持续时间短只有5d左右，再加之病毒分离的灵敏度低，实际上从患者血清、脑脊液中分离到病毒的成功率并不高。同样用免疫荧光法和免疫组化法检测组织中相应的病毒抗原阳性率也较低，限制了病毒分离培养的诊断价值。

目前血清学检测仍然在西尼罗病毒感染的诊断中起着重要作用。而近年来发展起来的分子生物学检测也显示了良好的应用前景，检测标本包括患者血清、脑脊液及鸟的组织和采集的蚊等。

虽然进行了一系列关于西尼罗病毒的研究，如采用杆状病毒-昆虫细胞表达系统可以西尼罗病毒囊膜E蛋白，可以为WNV快速诊断方法及新型疫苗的建立奠定基础。然而对西尼罗热尚无特殊有效的药物或疗法。治疗西尼罗热的主要是支持疗法和对症治疗，增强机体的抵抗力和预防继发感染。因为利巴韦林和感染素在体外实验中均可以抑制西尼罗病毒复制，所以考虑抗病毒疗法。

[1]西尼罗病毒E蛋白在杆状病毒_昆虫细胞表达系统中的表达及其鉴定[J].

[2]西尼罗病毒研究进展[J].