活性α-突触核蛋白纤维原,病理反应见效快

上一篇 / 下一篇  2019-04-01 15:31:56/ 个人分类:重组蛋白

帕金森病(PD)又名震颤麻痹,是最常见的神经退行性疾病之一。流行病学显示,患病率为15~328/10万人口,>65岁人群约1%;发病率为10~21/10万人口/年。PD病因及发病机制尚未明确,可能与社会因素、药物因素、患者因素等有关。

PD病理改变为:中脑黑质致密部、蓝斑神经元色素脱失,黑质色素变淡及出现路易小体。PD神经生化改变为:中脑黑质致密部、蓝斑神经元脱失致上述部位及其神经末梢处多巴胺(DA)减少,(DA减少≥70%时产生PD临床表现),而黑质纹状体系统中与DA功能拮抗的乙酰胆碱(ACH)作用相对亢进,DA与ACH平衡失调。 

目前市面上的α-突触核蛋白均是无活性的,我们的活性聚集体可以模拟帕金森疾病模型,助力帕金森疾病的研究。

产品优势StressMarq 研发出可以直接注射到活体内产生病理反应的活性α-突触核蛋白纤维原,该方法制作疾病模型的时间要远远短于传统的基因改造小鼠、大鼠。通常注射后30天即可见到病理反应,而基因改造模型需要9个月到1年时间。 

两种α-突触核蛋白聚集检测方法: 

硫黄素T检测:硫黄素T (Thioflavin T) 是一种荧光染料,可以和富含β折叠的结构结合,例如α-突触核蛋白纤维原、Tau纤维原等。一旦结合,硫黄素T的发射光谱就会发生红移 ,并且荧光强度会增强,这是一个很好的用来检测纤维原形成的测试。 

活性突触核蛋白 (α-Syn) 聚合体 (SPR-322) 催化活性单体(SPR-321)形成新的聚合体. 

左侧硫黄素 T 发射光曲线展示了四种试验对象随时间增强的荧光强度(相关于α-Syn 蛋白聚合体),其中 10 nM 活性 α-Syn 聚合体(SPR-322) 与100 μm 活性 α-Syn 单体 (SPR-321) 混合物荧光增强最明显, 另外几组对比分别是活性 α-Syn 聚合物 (SPR-322) 、活性 α-Syn 单体 (SPR-321) 以及 Thioflavin T λex = 450 nm, λem = 485 nm. 

细胞检测:以下是使用被活性和对照α-突触核蛋白前体纤维原(PFFs)处理的神经元获取ICC的图片。活性α-突触核蛋白PFFs处理的原代大鼠海马体神经元显示了路易体的形成,而经对照α-突触核蛋白处理的神经元没有出现路易体形成。

D-F:被活性小鼠突触核蛋白聚集体(SPR-324) 4 µg/ml处理后显示路易体内含物(绿色)的形成以及细胞减少,

A-C:被无活性的对照突触核蛋白聚集体,处理时没有路易体内含物形成及细胞减少.  

组织: 原代海马体神经元(DIV16). 物种: 斯普拉-道来氏大鼠. 固定: 由PFA制作的3% 甲醛固定20分钟. 阻断: 1:1 PBS:LiCOR Odyssey Block (LiCOR, 927-40010) 以及 30 mL/mL, 0.1% triton-X 100 阻断 30 分钟. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗体 (1:1000), 以及兔抗pSer129 (1:800), 4°C下处理24 小时. 二抗: ATTO 546 驴抗小鼠 (1:700) 和 ATTO 488 驴抗兔 (1:700) 室温下孵育一小时 (复合图绿色). 复染色: Hoechst (蓝色) 细胞核染色, 1:3000 室温下孵育1小时. 细胞定位: 路易体内含物. 放大倍数: 20x.

D-F:原代大鼠海马体神经元被活性突触核蛋白聚集体(SPR-322) 4 µg/ml处理后显示路易体内含物(绿色)的形成

A-C:被对照突触核蛋白聚集体(SPR-317) 4 µg/ml处理时没有路易体内含物形成. 

组织: 原代海马体神经元. 物种: 斯普拉-道来氏大鼠. 固定: 由PFA制作的4% 甲醛. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗体, 稀释度 1:1000, 4°C下处理24 小时. 二抗: FITC 羊抗小鼠 (绿色) 稀释度 1:700室温下孵育1小时. 复染色: Hoechst (蓝色) 细胞核染色, 1:4000 室温下孵育1小时. 细胞定位: 路易体内含物. 放大倍数: 20x. 

为了满足不同客户的研究需求,艾美捷科技为您推荐细胞应激领域StressMarq研发的,针对α-突触核蛋白单体、聚集体及多应用,多种属相关抗体:

 

产品名称

活性

应用类型

货号

适用物种

重组人α-突触核蛋白单体(对照)
重组人α-突触核蛋白聚合体PFFs(对照)

Inactive

WB、SDS-PAGE、in vivo/vitro

SPR-316B
SPR-317B

 

重组人α-突触核蛋白单体
重组人α-突触核蛋白聚合体PFFs

Active

WB、SDS-PAGE、in vivo/vitro

SPR-321B
SPR-322B

 

重组小鼠α-突触核蛋白单体
重组小鼠α-突触核蛋白聚合体PFFs

Active

WB、SDS-PAGE、in vivo/vitro

SPR-323B
SPR-324B

 

小鼠抗小鼠α-突触核蛋白单抗
小鼠抗小鼠α-突触核蛋白单抗
小鼠抗小鼠α-突触核蛋白单抗

 

WB、ICC/IF
WB、IHC、ICC/IF
WB、IHC、ICC/IF

SMC-531D
SMC-532D
SMC-533D

人、小鼠、大鼠
人、小鼠、大鼠
人、小鼠、大鼠

小鼠抗人α-突触核蛋白单抗
兔抗人α-突触核蛋白多抗

 

WB、ICC/IF
WB

SMC-530D
SPC-800D

人、小鼠、大鼠

α-突触核蛋白 (磷酸化Ser129) 抗体
α-突触核蛋白 (磷酸化Tyr136) 抗体

 

WB、ICC/IF
WB

SPC-742D
SPC-1435D

人、小鼠
人、小鼠、大鼠

*以上蛋白提供100ug ,200ug,500ug,抗体提供12ug, 100ug等不同规格的包装,满足您多样化的需求。

*以上抗体可提供近17种偶联直标的抗体,包括:HRP,AP,生物素,链霉亲和素,FITC以及ATTO系列全光谱荧光染料。

 

厂家内部质检:


StressMarq Biosciences Inc. 在2007年成立于加拿大维多利亚,是一家生物科技公司,专门从事试剂与试剂盒研究,服务范围遍及全球50多个国家。 

StressMarq公司的核心技术领域为细胞应激(尤其是热休克蛋白(HSP)领域),离子通道,载体研究,同时在神经科学领域推出特有的具有生物活性的Tau蛋白与a-突触核蛋白。产品领域涉及到:细胞凋亡、细胞信号、通路和转运、细胞器标志物、热休克、神经生物学、神经科学、氧化应激、磷酸化运输等。 

除了提供用于进一步研究的相关工具外,StressMarq还提供全新的尖端研究工具,用于开发新的生物项目,包括a B晶体蛋白ELISA试剂盒(现在是公认的乳腺癌标志物);热休克同源蛋白70(Hsc70)ELISA试剂盒;以及用于神经衰退研究的Tau活性蛋白与a-突触核蛋白。 

本公司已将专业技术扩展到抗体、小分子离子通道与载体等更新领域,前者包括当前热门的核心领域:Nav、Cav、TRP、Kv、KCNQ、HCN,后者包括当前热门的核心领域:ENaC、NCC和NKCC2以及主要水通道蛋白载体。

作为StressMarq在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面

TAG: α-synuclein帕金森路易小体

 

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